詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
人細胞周期蛋白依賴性激酶2英文名稱:CDK2 ELISA kit產(chǎn)品別名:人CDK2 elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | CDK2 ELISA kit |
貨號 | CS-E3872 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻Y(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達比色法定量檢測試盒Rabbit Anti-Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds 兔抗長爪沙鼠IgG (親和層析純化)
細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光定量檢測試盒Rabbit Anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG (親和層析純化)
鈣ATP酶SERCA蛋白表達西方雜交分析試盒Donkey Anti-human IgG 驢抗人IgG (親和層析純化)
鈣ATP酶SERCA蛋白免疫共沉淀分析試盒Donkey Anti-rabbit IgG 驢抗兔IgG (親和層析純化)
鈣ATP酶SERCA蛋白表達ELISA定量檢測試盒Donkey Anti-Goat IgG 驢抗羊IgG (親和層析純化)
人細胞周期蛋白依賴性激酶2ELISA試劑盒細胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達流式細胞儀檢測試盒Donkey Anti-Guinea IgG 驢抗豚鼠IgG
載玻片細胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒Mouse Anti-Human Mu chain Monoclonal 鼠抗人IgM μ鏈單克隆抗體(親和層析純化)
冰凍切片組織鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒Anti-Human IgG(monoclonal antibody) 鼠抗人IgG單克隆抗體 (親和層析純化)
石蠟切片組織鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒Bovine IgG (親和純化) 牛IgG
載玻片細胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試盒Bovine IgM (親和純化) 牛IgM
冰凍切片組織鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試盒Chicken IgG (HPLC純化) 雞IgG
石蠟切片組織鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試盒Chicken IgM (親和純化) 雞IgM
細胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達比色法定量檢測試盒dog IgG (親和純化) 狗IgG
細胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達熒光定量檢測試盒dog IgM (親和純化) 狗IgM
鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達西方雜交分析試盒Goat IgG 羊IgG (HPLC純化)Rhodamine (TRITC)–conjugated Rabbit Anti-Goat IgG (H+L)
Rhodamine (TRITC)–conjugated Rabbit Anti-Goat IgG (H+L)英文名稱對照品人免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit,48T/96T 400mg
英文名稱:Adipo R2(adiponectin receptor 2)層粘連相關(guān)多肽蛋白1體
CPLX2英文名稱:BPIL2人銅藍蛋白(CP/CER)免疫試盒
英文名稱對照品小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit,48T/96T 250mg
英文名稱:PSAP/PAP peptide淺表層粘膜蛋白多糖體
CEBP gamma英文名稱:BTNL3人同源框A3(HOXA3)免疫試盒
C19orf42英文名稱:ADRA1A人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)免疫試盒
英文名稱:PSAP/PAP peptide (human)調(diào)控胚胎干細胞分化蛋白Lhx2體
CLIP2英文名稱:BPIL3人同型半胱(Hcy)免疫試盒