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實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng)
閱讀:3474 發(fā)布時(shí)間:2020-7-17實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)需要先制備混合反應(yīng)液,大劑量包裝的反應(yīng)試劑,使用前進(jìn)行分裝,盡量減少試劑的反復(fù)凍融。建議所有樣本要有三個(gè)重復(fù)。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程時(shí)需注意以下幾點(diǎn),有利于避免實(shí)驗(yàn)污染問(wèn)題。1.用稀釋的漂白劑或凈化劑擦拭凈化臺(tái)。2.在的配有紫外燈超凈式或者超靜臺(tái)中準(zhǔn)備樣品,理想的是樣品的準(zhǔn)備與PCR的擴(kuò)增分開(kāi)在不同的區(qū)域完成。3.在樣品制備和配制反應(yīng)過(guò)程中要勤換手頭。4.勤用稀釋的漂白劑擦拭移液器。5.只使用PCR級(jí)的水和PCR試劑進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)。5. 用帶旋蓋的 EP 管稀釋和配制反應(yīng)液。6. 在進(jìn)行 PCR 實(shí)驗(yàn)時(shí),還應(yīng)準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)模板的對(duì)照來(lái)驗(yàn)證有無(wú)污染發(fā)生,而且用熱啟動(dòng)酶防止反應(yīng)開(kāi)始之前的非特異性擴(kuò)增。在選擇適合做熒光定量PCR試劑凍干的凍干機(jī)時(shí),,要具有完整的PAT控制技術(shù),可對(duì)凍干過(guò)程進(jìn)行完整的控制和分析監(jiān)控。包括預(yù)凍全過(guò)程控制、預(yù)凍結(jié)束判定、升華全過(guò)程控制、升華結(jié)束判定、解析全過(guò)程控制及凍干結(jié)束判定。板層溫度均一度±1℃。系統(tǒng)極限真空度±1Pa。系統(tǒng)真空泄露率<3Pa.L/S。外界干擾熱量屏蔽。共晶點(diǎn)測(cè)試儀助力工藝開(kāi)發(fā)。全進(jìn)口配件。建議提高熒光PCR凍干的相關(guān)性。
型號(hào) | Pilot3-6T | Pilot5-8T | Pilot7-12T | Pilot10-15T |
凍干面積 | 0.42㎡ | 0.56㎡ | 0.84㎡ | 1.05㎡ |
∅22西林瓶裝量(20ML) | ≥900支 | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
∅16西林瓶裝量(5ML) | ≥1700支 | ≥2210支 | ≥3100支 | ≥4100支 |
冷阱溫度(空載) | -85℃ | |||
真空度(空載) | ≤1Pa | |||
板層溫度(空載) | -55℃ | |||
板層制冷方式 | 硅油循環(huán) | |||
板層數(shù)量 | 3+1 | 4+1 | 4+1 | 5+1 |
板層尺寸(mm) | 350*400 | 350*400 | 350*600 | 350*600 |
捕水能力 | 6L | 8L | 12L | 10L |
凍干效率 | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板層間距 | 100mm | 80mm | 90mm | 100mm |
穿墻隔離 | √ | √ | √ | √ |
凍干曲線擬合度 | 100% | 100% | 100% | 100% |
晶型控制 | √ | √ | √ | √ |
蒸汽分壓控制 | √ | √ | √ | √ |
升華結(jié)束判定 | √ | √ | √ | √ |
凍干終點(diǎn)測(cè)試 | √ | √ | √ | √ |
壓塞 | 液壓 | |||
整機(jī)尺寸 (約) | W860*D1400*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1700*H1900 | W860*D1700*H1900 |