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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
| RIPA裂解液（ 弱） | ||||||||
| RIPA Lysis Buffer | ||||||||
| Cat No:DY7021 | ||||||||
| Size:100ml | ||||||||
| 產(chǎn)品組分 | ||||||||
| 組分 Contents | LY7021 | |||||||
| RIPA裂解液 | 100ml | |||||||
| 儲(chǔ)運(yùn)條件 | ||||||||
| 4℃保存。 | ||||||||
| 說(shuō) 明 | ||||||||
| 本產(chǎn)品僅供科研使用，請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途。 | ||||||||
| 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 | ||||||||
| RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細(xì)胞快速裂解液，主要用于從動(dòng)物組織和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白，可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。按照其裂解液的強(qiáng)度可以分為強(qiáng)、中、弱三類(lèi)，具體特點(diǎn)和差異請(qǐng)參考附表2，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品。經(jīng)RIPA裂解液（弱）提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量、Western、IP等，特別適合于CO-IP檢測(cè)。 RIPA裂解液裂解RIPA裂解液（弱）的主要成分為50mM Tris（pH 7.4），150mM NaCl，1% NP-40，0.25% sodium deoxycholate，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多種抑制劑，可以有效抑制蛋白降解。 | ||||||||
| 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及注意事項(xiàng) | ||||||||
| 1．為防止蛋白降解，所有的操作盡量在冰上進(jìn)行。 | ||||||||
| 2．使用RIPA裂解液得到的蛋白樣品，可采用BCA法進(jìn)行蛋白定量，以測(cè)定蛋白濃度。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購(gòu)，如：LY7052 BCA蛋白定量試劑盒。本品含有高濃度的去垢劑，不能用Bradford法進(jìn)行蛋白定量。 | ||||||||
| 3．建議在使用RIPA裂解液前，向溶液中加入蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，以防止蛋白降解，或保持蛋白的磷酸化狀態(tài)。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購(gòu)，如：LY7150 蛋白酶抑制劑混合物，LY7151 磷酸酶抑制劑混合物。 | ||||||||
| 4．若需獲得更高濃度的蛋白，應(yīng)減少哺乳動(dòng)物蛋白抽提試劑的使用量。 | ||||||||
| 5． 對(duì)于培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞，推薦先使用常規(guī)方法消化細(xì)胞，再參考懸浮細(xì)胞蛋白提取步驟操作。 | ||||||||
| 6．對(duì)于離心獲得的細(xì)胞，若不確定細(xì)胞體積，可根據(jù)細(xì)胞數(shù)量計(jì)算RIPA裂解液的使用量。如5×106個(gè)Hela細(xì)胞約需加入500 μl RIPA裂解液，以此類(lèi)推。 | ||||||||
| RIPA裂解液（ 弱） | ||||||||
| RIPA Lysis Buffer | ||||||||
| Cat No:LY7021 | ||||||||
| Size:100ml | ||||||||
| 產(chǎn)品組分 | ||||||||
| 組分 Contents | LY7021 | |||||||
| RIPA裂解液 | 100ml | |||||||
| 儲(chǔ)運(yùn)條件 | ||||||||
| 4℃保存。 | ||||||||
| 說(shuō) 明 | ||||||||
| 本產(chǎn)品僅供科研使用，請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途。 | ||||||||
| 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 | ||||||||
| RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細(xì)胞快速裂解液，主要用于從動(dòng)物組織和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白，可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。按照其裂解液的強(qiáng)度可以分為強(qiáng)、中、弱三類(lèi)，具體特點(diǎn)和差異請(qǐng)參考附表2，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品。經(jīng)RIPA裂解液（弱）提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量、Western、IP等，特別適合于CO-IP檢測(cè)。 RIPA裂解液裂解RIPA裂解液（弱）的主要成分為50mM Tris（pH 7.4），150mM NaCl，1% NP-40，0.25% sodium deoxycholate，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多種抑制劑，可以有效抑制蛋白降解。 | ||||||||
| 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及注意事項(xiàng) | ||||||||
| 1．為防止蛋白降解，所有的操作盡量在冰上進(jìn)行。 | ||||||||
| 2．使用RIPA裂解液得到的蛋白樣品，可采用BCA法進(jìn)行蛋白定量，以測(cè)定蛋白濃度。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購(gòu)，如：LY7052 BCA蛋白定量試劑盒。本品含有高濃度的去垢劑，不能用Bradford法進(jìn)行蛋白定量。 | ||||||||
| 3．建議在使用RIPA裂解液前，向溶液中加入蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，以防止蛋白降解，或保持蛋白的磷酸化狀態(tài)。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購(gòu)，如：LY7150 蛋白酶抑制劑混合物，LY7151 磷酸酶抑制劑混合物。 | ||||||||
| 4．若需獲得更高濃度的蛋白，應(yīng)減少哺乳動(dòng)物蛋白抽提試劑的使用量。 | ||||||||
| 5． 對(duì)于培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞，推薦先使用常規(guī)方法消化細(xì)胞，再參考懸浮細(xì)胞蛋白提取步驟操作。 | ||||||||
| 6．對(duì)于離心獲得的細(xì)胞，若不確定細(xì)胞體積，可根據(jù)細(xì)胞數(shù)量計(jì)算RIPA裂解液的使用量。如5×106個(gè)Hela細(xì)胞約需加入500 μl RIPA裂解液，以此類(lèi)推。 | ||||||||
| 表2 蛋白裂解液性能、參數(shù)比較 | ||||||||
| 目錄號(hào) | LY7001 | LY7020 | LY7021 | |||||
| 產(chǎn)品名稱 | RIPA裂解液（強(qiáng)） | RIPA裂解液（中） | RIPA裂解液（弱） | |||||
| 有效裂解成分 | 1%Triton X-100， 1% sodium deoxycholate， 0.1% SDS | 1% NP-40， 0.5% sodium deoxycholate， 0.1% SDS | 1% NP-40， 0.25% sodium deoxycholate | |||||
| 裂解強(qiáng)度 | 強(qiáng) | 中 | 溫和 | |||||
| 膜蛋白提取 | 很好 | 較好 | 一般 | |||||
| 胞漿蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 | |||||
| 核蛋白提取 | 很好 | 較好 | 較好 | |||||
| 主要用途 | WB，IP | WB，IP | WB，IP，CO-IP | |||||