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Origami B 化轉表達感受態(tài)

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更新時間:2023-04-26 19:17:20瀏覽次數:562

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產品簡介

供貨周期 現貨 應用領域 生物產業(yè)
Origami B 化轉表達感受態(tài)
菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱為 JM109(DE3)??赏瑫r表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX,
pMAL

詳細介紹

Origami B 化轉表達感受態(tài)

產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態(tài)細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min; 3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min; 5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

Origami B 化轉表達感受態(tài)

注意事項 1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用; 2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10; 3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)??赏瑫r表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態(tài)細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。  存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min; 5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。 注意事項 1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;

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2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10; 3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態(tài)細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。  存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min; 4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min; 5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。 注意事項 1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用; 2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10; 3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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