Rosetta-gami 2 （DE3）pLysS

Rosetta-gami 2 （DE3）pLysS 產(chǎn)品簡介
本菌株含有 pRARE2 質(zhì)粒，除了能夠提供原 Rosetta（DE3）宿主菌含有 的
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個(gè)稀有密碼子
CGG 的 tRNA。Rosetta2 載體通過提供稀有密碼子，使得該宿主菌相對(duì)于其他大腸桿菌

Rosetta-gami(DE3)PLysS

 

產(chǎn)品簡介

Rosetta 2 來源于 Rosetta，本菌株含有 pRARE2 質(zhì)粒，除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的

AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個(gè)稀有密碼子

CGG 的 tRNA。Rosetta2 載體通過提供稀有密碼子，使得該宿主菌相對(duì)于其他大腸桿菌，能夠提供

更加“通用”的蛋白質(zhì)表達(dá)，從而提升目的蛋白表達(dá)水平。同時(shí)，pRARE2 質(zhì)粒具有氯霉素抗性。經(jīng)

PUC18 質(zhì)粒檢測(cè)，感受態(tài)細(xì)胞的效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

CC96143-01

CC96143-02

CC96143-03

Rosetta 2 感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)

Rosetta-gami(DE3)PLysS

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

除 pRARE2 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

Rosetta-gami(DE3)PLysS

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

產(chǎn)品簡介

Rosetta 2 來源于 Rosetta，本菌株含有 pRARE2 質(zhì)粒，除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的

AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個(gè)稀有密碼子

CGG 的 tRNA。Rosetta2 載體通過提供稀有密碼子，使得該宿主菌相對(duì)于其他大腸桿菌，能夠提供

更加“通用”的蛋白質(zhì)表達(dá)，從而提升目的蛋白表達(dá)水平。同時(shí)，pRARE2 質(zhì)粒具有氯霉素抗性。經(jīng)

PUC18 質(zhì)粒檢測(cè)，感受態(tài)細(xì)胞的效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

CC96143-01

CC96143-02

CC96143-03

Rosetta 2 感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

除 pRARE2 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。