詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本公司生產(chǎn)的 XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌 XL1-Blue 菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)
胞,可用于 DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用 pUC18 質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107 cfu/µg,-80℃保存幾個(gè)月
轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。質(zhì)量穩(wěn)定,使用方便,質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。
產(chǎn)品組成
組分
XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:recA1endA1gyrA96thi-1hsdR17supE44relA1lac[F’proABlacIqZ:M15Tn10(tetr)]
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產(chǎn)品特性
-適用于高效的 DNA 克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增;
-能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制;
-適合非甲基化 DNA 的轉(zhuǎn)化;
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。