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詳細介紹
產品簡介
XL1-Blue MRF'Kan 菌株來源于 XL1-Blue 株系，屬于限制酶系統(tǒng)缺失型菌株，且具有卡那m素抗性
(KanR)。recA1和endA1基因的突變有利于插入外源DNA片段的穩(wěn)定性和高純度質粒DNA的提取。
hsdR17 突變導致 EcoK 核酸內切酶系統(tǒng)缺失，同樣提高了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質量。
lacIqZΔM15 的存在使 XL1-Blue MRF’Kan 菌株可用于藍、白斑篩選實驗。XL1-Blue MRF'Kan 感受
態(tài)細胞經特殊工藝制作，pUC18 質粒檢測轉化效率>108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
XL1-Blue MRF' Kan
感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：?(mcrA)183 ?(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F'proAB
lacIqZ?M15 Tn5 (KanR)]
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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