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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
JM108 來源于 JM106 菌株，最初是作為黏粒文庫的宿主被改造而成。 JM108 菌株缺失核酸內(nèi)切酶
(endA)，提高了質(zhì)粒 DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量；重組酶缺陷型 (recA)減少插入片段的同源重組概率，保證
了插入 DNA 的穩(wěn)定性。JM108 菌株最大的特點是擴(kuò)繁質(zhì)粒產(chǎn)量大，純度高，且質(zhì)量穩(wěn)定，特別是
超螺旋質(zhì)粒比例較高，超螺旋質(zhì)粒所占比例一般>90%（gyrA96 突變型說明 JM108 菌株的 DNA
gyrase 基因被突變，導(dǎo)致拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ的功能受影響，增加了超螺旋質(zhì)粒的比例)，非常適合后續(xù)
的動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗（超螺旋質(zhì)?？商岣呒?xì)胞轉(zhuǎn)染的效率）。此外該菌株具有萘啶酮酸抗性。吐
露港生物開發(fā)的 JM108 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
JM108 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：FendA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (rK- mK+)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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