詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
INV110/ 大腸桿菌來(lái)源于 JM110 /大腸桿菌,專門用于質(zhì)粒 DNA 的生長(zhǎng)和純化,該質(zhì)粒 DNA 將被
dam 或 dcm 甲基化敏感限制性酶消化。INV110 是 JM110 菌株的顯著改進(jìn)。INV110 已經(jīng)被改造成
攜帶 endA1 突變,這消除了非特異性內(nèi)切核酸酶 I,用于改進(jìn)質(zhì)粒 DNA 制備。此外,INV110 基因
型特征:重組克隆的藍(lán)/白篩選( LaCZδM15 )減少外源甲基化 DNA 的切割,以改善基因組 DNA 的轉(zhuǎn)
化[δ( mcrC - mrr ) ]F 噬菌體感染和拯救單鏈 DNA 的附加體。
產(chǎn)品組成
組分
CC96137-03
INV110 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。