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DH10Bac 感受態(tài)

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  • 型號 CC96136
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2024-11-04 16:49:50瀏覽次數(shù):147

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產(chǎn)品簡介

DH10Bac 菌株主要用于生產(chǎn)重組桿狀病毒分子(Bac-to-Bac 桿狀病毒表達系統(tǒng))。該菌株中含有父
本 bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124;其中, bMON14272 中包含 mini-F 復制子, 卡那抗
性基因, attTn7 位點和 lacZα 互補因子;而輔助質(zhì)粒 pMON7124 含有 tnsABCD 區(qū),可表達轉(zhuǎn)座蛋白
來幫助把供體質(zhì)粒上的 mini

詳細介紹

產(chǎn)品簡介
DH10Bac 菌株主要用于生產(chǎn)重組桿狀病毒分子(Bac-to-Bac 桿狀病毒表達系統(tǒng))。該菌株中含有父
本 bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124;其中, bMON14272 中包含 mini-F 復制子卡那抗
性基因, attTn7 位點和 lacZα 互補因子;而輔助質(zhì)粒 pMON7124 含有 tnsABCD 區(qū),可表達轉(zhuǎn)座蛋白
來幫助把供體質(zhì)粒上的 mini-Tn7 插入到父本的 bacmid 上的靶標位點。當 DH10Bac 感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化
了在多克隆位點克隆了外源片段的供體質(zhì)粒(如 pFastBac)時,該菌株可生成復合 bacmid。DH10Bac
菌株攜帶 ?80lacZΔM15 突變,因此可用于藍白斑篩選實驗。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,DH10Bac 
受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 10cfu/μg DNA
產(chǎn)品組成
組分 
DH10Bac
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBCφ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL
nupG /pMON14272 / pMON7124
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100 μL感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30 min
3. 將離心管置于42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激90s后,立刻置于冰浴中靜置2-3 min;
4. 向離心管中加入900 μL LBSOC培養(yǎng)基(室溫或37 ℃預熱),后置于37 ℃搖床復壯45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化DNA的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化DNA后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。


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