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更新時(shí)間:2024-10-25 10:10:19瀏覽次數(shù):2039評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1L/瓶 |
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貨號(hào) | 96-001-01 | 主要用途 | 昆蟲細(xì)胞培養(yǎng) |
產(chǎn)品描述
ESF 921™昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基是一種完整的無血清、無蛋白的培養(yǎng)基,用于穩(wěn)定的細(xì)胞生長(zhǎng)、蛋白表達(dá)和桿狀病毒載體的生產(chǎn),用于昆 蟲細(xì)胞,包括Sf9、Sf21、Tni和果蠅S2。僅供研究使用,不適用于診斷程序。
產(chǎn)品信息
ESF921是一個(gè)1倍完整的不用稀釋、即用的培養(yǎng)基。無需添加谷AN酰胺或表面活性劑,如泊洛沙姆188;不推薦使用KANG生素,然而, 必要時(shí),可以使用QING霉素-LIAN霉素(雙抗)或慶DA霉素(三抗)。
安全信息
請(qǐng)閱讀安全數(shù)據(jù)表(SDS),并遵循操作說明;佩戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)眼鏡、衣服和手套。
培養(yǎng)
培養(yǎng)基: ESF 921
細(xì)胞系(s):Sf9、Sf21、Tni、S2
培養(yǎng)類型:懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)
推薦培養(yǎng)容器:搖瓶或轉(zhuǎn)瓶
溫度范圍:27°C至28°C
培養(yǎng)箱:干燥,無二氧化碳環(huán)境。確保適當(dāng)?shù)臍怏w交換,盡量減少培養(yǎng)物暴露在光線下。
細(xì)胞對(duì)于ESF 921培養(yǎng)基的使用馴化
細(xì)胞適應(yīng)ESF 921培養(yǎng)基時(shí),建議使用梯度適應(yīng)。在開始適應(yīng)過程之前,細(xì)胞存活率至少要達(dá)到95% (Sf9)、93% (Tni)、90% (Sf21)或85% (S2),并且生長(zhǎng)速度處于細(xì)胞分裂對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
1.將細(xì)胞傳代至esf921與原始培養(yǎng)基的比例為50:50。在適應(yīng)過程中,按照1 × 個(gè)細(xì)胞/ mL的原始播種密度接種。
2.在干燥、無二氧化碳培養(yǎng)箱中以27°C培養(yǎng),在軌道搖床平臺(tái)上以120-140 rpm旋轉(zhuǎn)搖瓶培養(yǎng)物。松開蓋子,允許氣體交換。
3.當(dāng)活細(xì)胞數(shù)量為4-6 × 個(gè)/ mL時(shí)傳代(分裂后3-4天),按照75:25的比例放入ESF 921原始培養(yǎng)基中。
4.重復(fù)上一步,增加ESF 921與原始培養(yǎng)基的比例(75:25,然后是88:12,95:5),直到使用100% ESF 921??赡苄枰谝?種比例的情況下傳代多次。
5.昆蟲細(xì)胞在適應(yīng)過程中可能會(huì)膨脹。膨脹2-3微米是正?,F(xiàn)象,5微米以上是細(xì)胞應(yīng)激培養(yǎng)的提醒,應(yīng)該用一批新的細(xì)胞重新開始 適應(yīng)。 在100% ESF 921中傳代幾次后,活細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)符合上表,存活率>90%。
低溫冷藏
1.凍存培養(yǎng)基為無菌過濾的90% ESF 921+10%DMSO??商砑?.15 M的海藻糖,在4°C進(jìn)行存儲(chǔ)和使用。
2.準(zhǔn)備所需數(shù)量的細(xì)胞,在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,活力>90%。
3.確定活細(xì)胞的密度,并計(jì)算所需的冷凍介質(zhì)的體積,保證最終的細(xì)胞密度在25-50x106細(xì)胞/mL。
4.1000 rpm離心5分鐘,收獲細(xì)胞,將細(xì)胞重懸于預(yù)定體積的4°C冷凍培養(yǎng)基中。
5.按照1mL等分懸浮液放入冷凍瓶中。
6.按照標(biāo)準(zhǔn)程序(每分鐘降低1°C)在自動(dòng)或手動(dòng)控制速率的冷凍設(shè)備中實(shí)現(xiàn)低溫保存。
7.將冷凍細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮中,建議在-200°C至-125°C的氣相儲(chǔ)存。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)