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5×蛋白上樣緩沖液（含DTT）

產(chǎn)品貨號：T15257

產(chǎn)品規(guī)格：10ml

產(chǎn)品簡介：

  5×蛋白上樣緩沖液（含DTT）(Buffer)適用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS，DTT，溴 酚藍(lán)，緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷，這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷完 全被SDS掩蓋，消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異；SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的 二級和三級結(jié)構(gòu)。DTT可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。 終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑，可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。

操作步驟(僅供參考)：

1. 請按每40μL蛋白樣品加入10μL上樣緩沖液的比例(5倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度過高，可用雙蒸水稀釋。

2. 混勻后，100℃水浴加熱5-10分鐘，使蛋白變性。

3. 冷卻至室溫后，10000-14000rpm離心2-5分鐘，取上清直接上樣電泳即可。

注意事項(xiàng)：

1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時(shí)溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在30kd左右，膠濃度為12%時(shí)，約在20kd左右，膠 濃度為15%時(shí)，大概在10kd。請根據(jù)自己目的條帶來判斷電泳時(shí)間。

2. 本試劑因含DTT，有一定的毒性，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍(lán)指示劑，PH 值受保存溫度影響，在低溫凍存狀態(tài)下，溶液可能會呈現(xiàn)深棕色， 不影響產(chǎn)品使用。

保存條件：

?  -20℃保存，建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融，自發(fā)貨之日起至少12個(gè)月有效。