桿粒提取試劑盒（核酸提取純化相關(guān)） 返回列表頁

產(chǎn)品貨號：10123

產(chǎn)品規(guī)格：100 次/200 次

產(chǎn)品簡介：

桿粒提取試劑盒（核酸提取純化相關(guān)）適用于大量從DH10Bac轉(zhuǎn)化株提取重組桿粒pFastBac。純化后的桿粒DNA使用PCR檢驗或者進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

包裝清單：

自備試劑：50 次自備 36ml 無水乙醇/100 次自備 72ml 無水乙醇/100 次自備 144ml 無水乙醇。

操作步驟：

1. 將估計 DNA 反應(yīng)液的體積，加入 5 倍體積的 Buffer PG，充分混勻（無需去除石蠟油或礦物油）。 注意：如 DNA 反應(yīng)體系為 50µl(不包括石蠟油體積)，則加入 250 µl Buffer PG。

2. 柱平衡：向已裝入收集管（Collection Tubes）中的吸附柱（Spin Columns）中加入 200μl Buffer

3. PS，12000 rpm 離心 1 分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

4. 將步驟 3 或 4 所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中，室溫放置 2 分鐘，12000 rpm 離心 1 分鐘，倒掉收 集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

5. 向吸附柱中加入 450 μl Buffer PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000 rpm 離心 1 分鐘，倒掉收 集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

注意：如果純化的 DNA 用于鹽敏感的實驗（例如平末端連接或直接測序），建議加入 Buffer PW 靜置 2-5 分鐘再離心。

6. 重復(fù)步驟 4。

7. 12000 rpm 離心 1 分鐘，倒掉收集管中的廢液。

注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶促反應(yīng)（酶切、PCR 等）。 將吸附柱放到一個新的 1.5 ml 離心管（自備）中，向吸附膜中間位置懸空滴加 50μlBuffer EB，室溫放置 2 分鐘。 12000 rpm 離心 1 分鐘，收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA。

注意事項：

1. 使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在 Buffer PW 中加入無水乙醇。

2. 所有離心步驟均可室溫下進(jìn)行。