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維生素C檢測試劑盒（菲咯啉比色法）

產(chǎn)品貨號：BA1722

產(chǎn)品規(guī)格：50T

產(chǎn)品簡介：

維生素C(Vitamin C)又稱L-抗壞血酸，是高等靈長類動物與其他少數(shù)生物的必需營養(yǎng)素。在生物體內(nèi)，維生素C是一種抗氧化劑，為酸性己糖衍生物，是稀醇式己糖酸內(nèi)酯，保護(hù)身體免于自由基的威脅，同時也是一種輔酶，其廣泛的食物來源為各類新鮮蔬果。Vc有L-型和D-型兩種異構(gòu)體，只有L-型的才具有生理功能，還原型和氧化型都有生理活性。

尚寶生物 維生素C檢測試劑盒(菲咯啉比色法)檢測原理是在酸性條件下，維生素C把三價鐵離子還原成亞鐵離子，后者與菲咯啉形成穩(wěn)定的紅色螯合物，以分光光度計(jì)534nm處檢測吸光度，在一定濃度范圍(樣品濃度控制在10~250μ g/ml)吸光度與維生素C含量呈線性關(guān)系，獲得Vitamin C含量。該試劑盒主要用于植物組織中的維生素C(抗壞血酸)的檢測，其優(yōu)點(diǎn)是：1、反應(yīng)穩(wěn)定，不易褪色；2、操作簡便；3、還原糖及其他常見的還原物質(zhì)對實(shí)驗(yàn)沒有干擾，因此專一性好；4、靈敏度高。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1.        蒸餾水

2.        無水乙醇

3.        研缽或勻漿器

4.        離心管或試管

5.        離心機(jī)

6.        比色杯

7.        分光光度計(jì)

操作步驟：

1.        稀釋組織勻漿液：按組織勻漿液(5×)：蒸餾水=4：1的比例稀釋，獲得1×組織勻漿液，待用。

2.        準(zhǔn)備樣品：取待測材料如青菜、水果、松針等，清洗擦干，準(zhǔn)確稱量5g，加入研磨器內(nèi)。加入少量1×組織勻漿液，研磨碎，留取上清，再次用1×組織勻漿液研磨，最后一并倒入50ml離心管，補(bǔ)充1×組織勻漿液至45ml。充分混勻后，4000g離心5min，上清液即為待測液。

3.        配制系列Vitamin C標(biāo)準(zhǔn)：取干凈離心管或試管，按下表進(jìn)行操作，依次稀釋。

4.        Vitamin C加樣：按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的 Vitamin C 含量過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測最好能設(shè)置2平行管，求平均值。

5.        Vitamin C測定：立即混勻，以空白調(diào)零，比色光徑1cm，以分光光度計(jì)測定534nm處系列標(biāo)準(zhǔn)管、測定管的吸光度。

計(jì)算：

以系列標(biāo)準(zhǔn)Vitamin C (10、20、40、60、80、100μg)為橫坐標(biāo)，以對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得維生素C含量。

維生素C含量(mg/100g)=(m₀×V _T×100)/(m1×V_S×1000)

式中：m₀ =根據(jù)待測樣品的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的維生素C的質(zhì)量(μg)

V_T =待測液的總體積(ml)

m₁ =樣品質(zhì)量(g)

V_S =測定時取樣體積(ml)

100=100g

注意事項(xiàng)：

1.        上述低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降。

2.        組織勻漿液(5×)久置或低溫保存，容易產(chǎn)生乳白色渾濁。如果白色渾濁不明顯，可以直接使用，不影響效果；如果白色渾濁較多，應(yīng)棄用。

3.        待測樣本如不能及時測定，應(yīng)置于2~8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定。

4.        如果樣品濃度過高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

保存條件：6個月有效。