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BA1798
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上海市
120T 890元 999盒 可售
更新時(shí)間:2022-03-09 17:09:48瀏覽次數(shù):278次
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貨號(hào) | BA1798 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
植物總酚含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):BA1798
產(chǎn)品規(guī)格:120T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
酚類(lèi)物質(zhì)是植物體中重要的次生物質(zhì),對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育有一定的調(diào)節(jié)作用,能夠清除自由基起到抗氧化的作用,并具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用,同時(shí)在植物抗病、基因的誘導(dǎo)表達(dá)和生物固氮等方面也具有重要作用,在化妝品、食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。酚類(lèi)物質(zhì)在堿性條件下能夠?qū)㈡u鉬酸還原生成藍(lán)色化合物,產(chǎn)物在760nm處具有特征吸收峰,通過(guò)吸光值的變化即可定量檢測(cè)植物中總酚的含量。
產(chǎn)品組成:
名稱(chēng) | 規(guī)格 | 保存條件 | 使用說(shuō)明及注意事項(xiàng) |
提取液 | 液體120mLx1瓶 | 4℃ | - |
試劑一 | 液體5mLx1瓶 | 4℃ 避光 | 具有刺激性,操作時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)措施 |
試劑二 | 液體8mLx1瓶 | 4℃ | - |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑x1支 (5mg沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品) | 4℃ 避光 | 使用前加入1mL蒸餾水充分溶解 (可50℃加熱促溶,即為5mg/mL沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)液) |
標(biāo)準(zhǔn)稀釋液的制備:將5mg/mL沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)液使用蒸餾水稀釋至0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125mg/mL即為標(biāo)準(zhǔn)稀釋液。 |
序號(hào) | A | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
稀釋前濃度(mg/mL) | 5.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 0.1 | 0.05 | 0.025 |
標(biāo)準(zhǔn)液體積(μL) | 100 | 150 | 100 | 50 | 200 | 200 | 200 |
蒸餾水體積(μL) | 400 | 350 | 400 | 450 | 200 | 200 | 200 |
稀釋后濃度(mg/mL) | 1.0 | 0.3 | 0.2 | 0.1 | 0.05 | 0.025 | 0.0125 |
操作步驟(僅供參考):
1. 植物總酚的提?。筛鶕?jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例):植物樣本烘干至恒重,粉碎后過(guò)30-50目篩;稱(chēng)取約100mg粉碎樣本,加入2mL提取液,超聲提?。?/span>60℃,功率300W,超聲5s,間歇8s,總時(shí)間30min),12000rpm常溫離心10 min,取上清即為待測(cè)樣本。
2. 測(cè)定步驟:①分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm,蒸餾水調(diào)零。
②在96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列試劑:
試劑 | 測(cè)定組(μL) | 對(duì)照組(μL) | 標(biāo)準(zhǔn)組(μL) | 空白組(μL) |
待測(cè)樣本 | 10 | 10 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)稀釋液 | - | - | 10 | - |
蒸餾水 | - | - | - | 10 |
試劑一 | 50 | - | 50 | 50 |
充分混勻,25℃靜置2min | ||||
試劑二 | 50 | 50 | 50 | 50 |
蒸餾水 | 90 | 140 | 90 | 90 |
充分混勻,25℃靜置10min |
吸光值測(cè)定:測(cè)定760nm處吸光值,記為A測(cè)定、A對(duì)照、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白;計(jì)算?A測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照,?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。注:每個(gè)測(cè)定組均需設(shè)一個(gè)對(duì)照組,空白組只需測(cè)定1-2次。
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的建立:以0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125mg/mL為橫坐標(biāo)(x),以其對(duì)應(yīng)的?A標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)(y),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b,將?A測(cè)定帶入公式中得到x(mg/mL)。
3. 植物總酚含量計(jì)算
①按植物樣本蛋白濃度計(jì)算
總酚含量(mg/mg prot)= x×V提取/(Cpr×V提取)=x/Cpr
②按植物樣本質(zhì)量計(jì)算
總酚含量(mg/g)=x×V提取/W=2×x/W
注釋?zhuān)?/span>V提:提取液總體積,2mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
1. 若測(cè)定吸光值超出標(biāo)準(zhǔn)吸光值線(xiàn)性范圍,建議適當(dāng)增加樣本量或?qū)⒋郎y(cè)樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改。
2. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失,測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)(以實(shí)際收到說(shuō)明書(shū)內(nèi)容為準(zhǔn)),確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定。
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