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產(chǎn)品分類品牌分類

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抗體: 小鼠抗牛血清白蛋白

動(dòng)物血清: 胎牛血清

實(shí)驗(yàn)室玻璃儀器設(shè)備: 分子蒸餾器.薄膜蒸發(fā)器定氮儀消化爐配件玻璃反應(yīng)釜系列

食品安全檢測試劑盒: 試劑盒糧油檢測

動(dòng)物疫病試劑盒: 酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒大鼠白介素

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產(chǎn)品簡介詳細(xì)介紹

大鼠I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物（β-CTX）
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗夾心ELISA法，所提供的ELISA是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）.預(yù)先包被的抗體抗大鼠IV型膠原酶（IV-C）GPER單克隆抗體，測相抗體為多克隆抗體，經(jīng)生物素標(biāo)記（biotin）標(biāo)記，樣品和生物標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)孔反應(yīng)后。

大鼠I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物(β-CTX)

【操作步驟】

從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗(yàn)所需板條，未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內(nèi)封存于 2-8℃。
預(yù)留空白孔（若使用雙波長讀板，空白孔可以不設(shè)）。
分別將標(biāo)本或不同濃度人 Nesfatin-1 標(biāo)準(zhǔn)品（0pg/ml 孔加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液）加入相應(yīng)孔中

(100μl/孔)，用封板膠紙封住反應(yīng)孔，37℃孵箱孵育 90 分鐘。

提前 30 分鐘制備生物素化人 Nesfatin-1 抗體工作液。
洗板 2 次。
加入生物素化人 Nesfatin-1 抗體工作液(100μl/孔)。用封板膠紙封住反應(yīng)孔，37℃孵箱孵育 60 分鐘。
提前 30 分鐘制備酶結(jié)合物工作液。室溫避光放置。
洗板 3 次。
除空白孔外，加入酶結(jié)合物工作液(100μl/孔)。用封板膠紙封住反應(yīng)孔，37℃孵箱，避光孵育 30 分鐘。
洗板 5 次。
加入 TMB 顯色工作液（包括空白孔）100μl/孔，37℃孵箱，避光孵育，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線高

濃度的顏色較深，有明顯的顏色梯度的時(shí)候，即可終止。試驗(yàn)顯色反應(yīng)請勿超過 30 分鐘。

加入終止液（包括空白孔）100μl/孔，混勻后即刻測量 OD（450nm）值(10 分鐘內(nèi))。

大鼠I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物(β-CTX)【結(jié)果判斷】

每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的 OD 值應(yīng)減去零孔的 OD 值。（若不減零孔值，標(biāo)準(zhǔn)曲線的零孔應(yīng)相交于 Y 軸）
手工繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，OD 值作縱坐標(biāo)，以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)。通過標(biāo)本的 OD 值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析，如 curve expert 1.3 進(jìn)行結(jié)果計(jì)算。
若標(biāo)本 OD 值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測，計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

【操作步驟】

大鼠I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物(β-CTX)【結(jié)果判斷】

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