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當前位置:上海富雨生物科技有限公司>>細胞庫 / 細胞培養(yǎng)>>ATCC細胞>> PATU 8988S人胰腺癌細
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更新時間:2025-02-11 16:08:01瀏覽次數(shù):20次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)產(chǎn)品名稱:PATU 8988S人胰腺癌細胞 、PATU 8988S人胰腺癌細胞 、PATU 8988S人胰腺癌細胞 、PATU 8988S人胰腺癌細胞 細胞特性 1) 來源:胰腺 2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長 3)含量:>1x106 個/mL 4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式: (1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇; (2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 (3) 收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。 細胞用途: 僅供科研使用。 細胞接收后的處理: 1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的培養(yǎng)基。 4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。 5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。 細胞培養(yǎng)步驟 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1) 準備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注:次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。 3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。 下面T25瓶為類; 1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。 3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
南京萬木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細胞、 外泌體、ELISA 試劑盒、 抗體、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學、信號轉(zhuǎn)導、代謝、 神經(jīng)科學等領(lǐng)域內(nèi)都有科學文獻發(fā)表,被國內(nèi)外多所大學、研究機構(gòu)和藥學平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認可。
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