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當(dāng)前位置:上海富雨生物科技有限公司>>細胞庫 / 細胞培養(yǎng)>>ATCC細胞>> CSQT-2人肝癌細胞(附ST
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更新時間:2025-02-11 23:13:10瀏覽次數(shù):9次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)產(chǎn)品名稱:CSQT-2人肝癌細胞、CSQT-2人肝癌細胞、CSQT-2人肝癌細胞、CSQT-2人肝癌細胞? ? 細胞介紹 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 細胞特性 1) 來源:肝癌 2) 形態(tài):上皮細胞樣 3) 含量:>1x106 個/mL 4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式 (1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇; (2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 細胞用途:僅供科研使用。 細胞培養(yǎng)步驟 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1) 準備MEM培養(yǎng)基(MEM-EBSS:Minimum Essential Medium(MEM Eagles with Earle’s Balanced Salts) ),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。 二. 細胞處理: 1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。 ? ?
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