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產(chǎn)品名稱：L-WRN小鼠皮下結締組織細胞、L-WRN小鼠皮下結締組織細胞、L-WRN小鼠皮下結締組織細胞、L-WRN小鼠皮下結締組織細胞；

常溫細胞收貨當天處理方式

1.收到常溫細胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。

2.鏡下觀察有無微生物污染現(xiàn)象，拍照記錄不同倍數(shù)鏡下細胞狀態(tài)和有無染菌現(xiàn)象，方便后續(xù)售后處理。

3.用 75%酒精擦拭瓶身，置于培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 2~4h 后進行傳代操作。

4.觀察細胞密度若超過 80%則可正常傳代處理(有的原代細胞不可傳代，請根據(jù)實際情況決定)，傳代推薦比例 1：2 到 1：3（按實際收貨細胞密度決定，若不確定可聯(lián)系技術支持）；若細胞密度不到 80%則可取出部分培養(yǎng)基留 6ml 左右原瓶培養(yǎng) 基繼續(xù)培養(yǎng)，注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋；懸浮細胞注意離心所有培養(yǎng)基以收集細胞。

5.由于氣溫，運輸?shù)扔绊懺斐少N壁細胞漂浮的，請將細胞離心收集后在離心管中消化后進行傳代（參考附件），或及時聯(lián)系技術支持進行指導傳代。

6.若觀察到異?；蛘邔毎幸蓡枺埣皶r跟代理商或者我們聯(lián)系；對于細胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)注意事項有疑問的，可跟我們的技術支持交流。

附:收到貼壁細胞漂浮處理方法（部分細胞由于貼壁松散，會出現(xiàn)運輸后漂浮，冬天氣溫低時也會出現(xiàn)細胞收縮漂浮，屬于不可避免因素，正確處理后都可以正常生長）

1、將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基轉入無菌離心管，離心收集細胞（1200rpm 3min）去除舊培養(yǎng)基；

2、用 PBS 重懸細胞，將所有細胞收集到一個離心管中，再次離心（1200rpm 3min）去除 PBS；

3、加入 1ml 左右 0.25%重懸細胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養(yǎng)箱消化細胞，根據(jù)細胞特性決定消化時間（TM3、TM4、293 系列約 1~2 分鐘）；

4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散，迅速加入 3-5ml 含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化，離心（1200rpm 3min）去除；

5、加入 5ml 左右的細胞相應的培養(yǎng)基混勻，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶/皿中；

6、顯微鏡下觀察看細胞是否成均勻分散的單顆細胞，若有 3-5 個成團的小細胞團可不用重新消化，使之貼壁后待細胞生長穩(wěn)定后再消散細胞。

貼壁細胞傳代

1. 從培養(yǎng)容器中吸出用過的細胞培養(yǎng)基并丟棄；

2. 用不含鈣、鎂的沖洗細胞（每10cm 2培養(yǎng)表面積約2mL溶液）；從與貼壁細胞層相對的容器一側輕輕加入沖洗液，以避免攪動細胞層，前后搖晃容器數(shù)次（注：沖洗步驟可去除可能抑制解離劑作用的少量

血清、鈣和鎂）；

3. 從培養(yǎng)容器中吸出沖洗液并丟棄，向培養(yǎng)瓶中加入預熱的解離劑；試劑量應足以覆蓋細胞層(每10cm 2大約0.5mL)；

4. 輕輕搖晃容器，使試劑覆蓋細胞層；吸出多余解離試劑，T25 細胞培養(yǎng)瓶留 200ul 左右即可；

5. 將培養(yǎng)容器在室溫下孵育約 2分鐘（請注意實際孵育時間根據(jù)所用細胞不同而有所差異）；

6. 在顯微鏡下觀察細胞解離情況；如果解離程度未達 90%，可將孵育時間延長幾分鐘，每 30 秒鐘檢查一次解離情況；也可輕輕拍打培養(yǎng)容器以加快細胞解離；

7. 細胞解離程度大于等于 90%時，傾斜培養(yǎng)容器，使細胞上液體盡快流盡；加入所用解離劑兩倍體積的預熱生長培養(yǎng)基；吹打細胞層表面數(shù)次，使培養(yǎng)基分散；

8. 將細胞轉移到15mL 無菌離心管中，以 200×g 的離心力離心 3-5 分鐘（請注意離心速度和時間依細胞種類不同而有所差異）；

9. 用最少體積的預熱生長培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將細胞懸液按照推薦比例稀釋，并將適量體積的細胞懸液轉移到新的細胞培養(yǎng)容器中，把細胞放回培養(yǎng)箱（注：如果使用培養(yǎng)瓶，將其放入培養(yǎng)箱前應將瓶蓋旋松，以便進行充分的氣體交換，除非您使用的是通氣式培養(yǎng)瓶和透氣性瓶蓋）。

南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細胞、外泌體、ELISA 試劑盒、抗體、重組蛋白及相關試劑。產(chǎn)品在免疫學、信號轉導、代謝、神經(jīng)科學等領域內(nèi)都有科學文獻發(fā)表，被國內(nèi)外多所大學、研究機構和藥學平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認可。
品牌優(yōu)勢
1、產(chǎn)品優(yōu)勢：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好；
2、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過 QA、QC 檢測才可出庫；
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抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富，一抗 1 萬余種，二抗 100 多種；
重組蛋白：多項發(fā)明，原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白 1000 余種。