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HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞(附

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產(chǎn)品名稱(chēng):HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞、HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞、HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞、HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞細(xì)胞特性 1) 來(lái)源:人表皮 2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣 3) 含量:>1x106 個(gè)/mL 4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性 5) 規(guī)格:T2 5瓶或者1mL凍存管包裝 運(yùn)輸和保存 可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式 (1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇; (2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。 (3)收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。 細(xì)胞用途: 僅供科研使用。 細(xì)胞接收后的處理: 1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。 2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。 3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。 4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長(zhǎng),可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。 5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基)。 6) 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。 細(xì)胞培養(yǎng)步驟 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)基上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。 下面T25瓶為類(lèi); 1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。 3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

南京萬(wàn)木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專(zhuān)業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售細(xì)胞、 外泌體、ELISA 試劑盒、 抗體、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表,被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué)、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶(hù)的青睞和認(rèn)可。
品牌優(yōu)勢(shì)
1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好;
2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,每批次產(chǎn)品必須通過(guò) QA、QC 檢測(cè)才可出庫(kù);
3、實(shí)力強(qiáng)大: 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心,動(dòng)物房 ;
4、技術(shù)支持:技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問(wèn)題及時(shí)解答;
5、服務(wù)周到:發(fā)貨及時(shí),三個(gè)工作日順豐快遞;售后無(wú)憂(yōu),包退包換。
6、研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品:ELISA 試劑盒:人、大小鼠、牛、兔、山羊、倉(cāng)鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊多種屬1000多種指標(biāo);
抗體:兔多抗、鼠單抗種類(lèi)豐富,一抗 1 萬(wàn)余種,二抗 100 多種;
重組蛋白:多項(xiàng)發(fā)明,原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。

proinlammatory cytokines and CD4+ T cell iniltration into the mucosa in vivo. It is likely autophagy induction is also acting on numerous other cells and pathways that contribute to intestinal inlammation. For example, autophagy induction in colonic intestinal epithelial cells enhances barrier function (81, 82, 209, 219). Some of the autophagy modulators utilized in these studies include sirolimus

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