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含甲酰胺的測序膠

時間：2021/12/15閱讀：1384
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原理

聚丙烯酰胺凝膠加人甲酰胺可以使造成條帶壓縮的測序產(chǎn)物的二級結構不穩(wěn)定。

材料與儀器

DNA
甲酰胺 甲醇 乙醇 TEMED SDS
電泳儀

步驟

1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。

 
2.  按所需濃度配制甲酰胺凝膠溶液，加熱輕輕挽拌使之溶解，冷卻至30℃以下。

3.  加入0.15 ml TEMED及1 ml 10%過硫酸銨，馬上灌膠于凝膠平板夾層，觀察聚合情況。

4.  在45~70 W 恒功率下電泳。
 
5.  按基本方案步驟19~33進行干膠及處理，但步驟18在5%乙酸 / 20%甲醇固定液中固定凝膠15 min。


同實驗其他方法

變性凝膠電泳實驗

1.  制作每塊凝膠時，首先要用肥皂及水小心嚴格地清洗兩塊30 cm×40 cm的前后玻璃平板，用去離子水沖洗后晾干，用噴射洗瓶噴10%乙酵或異丙醇使平板濕海。 2.  然后用Kimwi

電解質梯度測序膠

1.  按基本方案步驟1~22灌制凝膠及進行預電泳，但上槽緩沖液為0.5×TBE，下槽為1×TBE。 2.  按基本方案步驟23~26步準備樣品及加樣。   3.

緩沖液梯度測序膠

1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。   2.  在2個100 ml 燒杯中，配制緩沖液梯度凝膠溶液：50 ml 用0.5×TBE配制，25 ml 用2.5×TBE配制

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎關注安培生物科技有限公司了解更多技術與產(chǎn)品資訊。


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