深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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含甲酰胺的測(cè)序膠

時(shí)間：2021/12/15閱讀：1046
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原理

聚丙烯酰胺凝膠加人甲酰胺可以使造成條帶壓縮的測(cè)序產(chǎn)物的二級(jí)結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定。

材料與儀器

DNA
甲酰胺 甲醇 乙醇 TEMED SDS
電泳儀

步驟

1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。

 
2.  按所需濃度配制甲酰胺凝膠溶液，加熱輕輕挽拌使之溶解，冷卻至30℃以下。

3.  加入0.15 ml TEMED及1 ml 10%過硫酸銨，馬上灌膠于凝膠平板夾層，觀察聚合情況。

4.  在45~70 W 恒功率下電泳。
 
5.  按基本方案步驟19~33進(jìn)行干膠及處理，但步驟18在5%乙酸 / 20%甲醇固定液中固定凝膠15 min。


同實(shí)驗(yàn)其他方法

變性凝膠電泳實(shí)驗(yàn)

1.  制作每塊凝膠時(shí)，首先要用肥皂及水小心嚴(yán)格地清洗兩塊30 cm×40 cm的前后玻璃平板，用去離子水沖洗后晾干，用噴射洗瓶噴10%乙酵或異丙醇使平板濕海。 2.  然后用Kimwi

電解質(zhì)梯度測(cè)序膠

1.  按基本方案步驟1~22灌制凝膠及進(jìn)行預(yù)電泳，但上槽緩沖液為0.5×TBE，下槽為1×TBE。 2.  按基本方案步驟23~26步準(zhǔn)備樣品及加樣。   3.

緩沖液梯度測(cè)序膠

1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。   2.  在2個(gè)100 ml 燒杯中，配制緩沖液梯度凝膠溶液：50 ml 用0.5×TBE配制，25 ml 用2.5×TBE配制

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


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