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為什么要使用原代細(xì)胞?

時(shí)間:2022/1/15閱讀:2951
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細(xì)胞體外培養(yǎng)很好地補(bǔ)充了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的不足,它讓細(xì)胞功能和進(jìn)程的研究更具可操作性。十幾年來(lái),細(xì)胞系已在科學(xué)發(fā)展中起了重要作用,然而僅僅由細(xì)胞系得來(lái)的數(shù)據(jù)越來(lái)越難有說(shuō)服力。細(xì)胞系誤認(rèn)和細(xì)胞不純等因素鞭策研究者們?cè)絹?lái)越傾向于使用原代細(xì)胞。

細(xì)胞系還有一個(gè)缺點(diǎn)是,它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型。相比之下,原代細(xì)胞保持了細(xì)胞在體內(nèi)的許多重要標(biāo)志和功能。例如內(nèi)皮細(xì)胞系缺少許多功能標(biāo)志,而原代內(nèi)皮細(xì)胞就保留了這些重要特征。


基因表達(dá)直接影響細(xì)胞功能,基因表達(dá)分析對(duì)研究原代細(xì)胞起重要作用。傳統(tǒng)的報(bào)告基因檢測(cè)和cDNA芯片方法往往需要轉(zhuǎn)染或大量高質(zhì)量RNA.但是原代細(xì)胞是出了名的難轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染效率根據(jù)細(xì)胞類型不同也差別很大。此外,原代細(xì)胞壽命有限,不能無(wú)限傳代,使得獲得大量RNA非常困難。

使用定量PCR芯片就可以克服這些困難。定量PCR芯片已經(jīng)用原代細(xì)胞cDNA驗(yàn)證和優(yōu)化過,能直接檢測(cè)原代細(xì)胞、干細(xì)胞、組織和細(xì)胞系的蛋白表達(dá),具有高靈敏度和特異性,即使很少量的模板也能檢測(cè)。


原代細(xì)胞的基因表達(dá)分析能使研究者更好的理解生物學(xué)通路和疾病進(jìn)程,如細(xì)胞周期規(guī)律,干細(xì)胞生物學(xué),癌癥發(fā)展和神經(jīng)紊亂等。原代細(xì)胞成為追求突破和更好療法的有力工具。

雖然原代細(xì)胞有諸多優(yōu)點(diǎn),但獲得高純度的原代細(xì)胞是一個(gè)非常艱巨的過程。比起細(xì)胞系,原代細(xì)胞可謂是極其敏感,需要額外添加經(jīng)典培養(yǎng)基所沒有的營(yíng)養(yǎng)。原代細(xì)胞要在專為每種細(xì)胞定制的特殊培養(yǎng)液中存活和生長(zhǎng)。例如內(nèi)皮細(xì)胞與上皮細(xì)胞或神經(jīng)元的營(yíng)養(yǎng)需求就大為不同,因此需要不同的特殊培養(yǎng)基。


傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)基靠血清提供生長(zhǎng)因子、激素、脂類和其他未知成分供細(xì)胞生長(zhǎng)。但高血清會(huì)導(dǎo)致原代細(xì)胞分化或助長(zhǎng)成纖維細(xì)胞等細(xì)胞的污染。此外,使用血清還需顧慮費(fèi)用增高和批次差異問題。使用低血清或無(wú)血清的特殊成分培養(yǎng)基不僅可以避開這些問題還能更好的促進(jìn)原代細(xì)胞的生長(zhǎng)。



以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


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安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。



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