實時熒光定量 PCR 的結(jié)果分析--實時熒光定量 PCR 常用名詞

校正染料 (ROX)

校正加樣誤差或孔與孔之間的誤差，提供一個穩(wěn)定的基線，極大地改進定量的精確 度，提高重復管之間的數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。

注意：不同的儀器對 ROX 的需求不同。

基線

PCR 的最初幾個循環(huán)，在 此基線上熒光信號幾乎沒有變化。

閾值

可以相信的最小熒光值。

CT 值

擴增曲線與閾值交點的橫坐標。

二、結(jié)果有效性判斷

融解曲線單峰 ( 染料法 )

擴增曲線指數(shù)擴增區(qū)域，復孔間 CT 值 STD<0.2

閾值設置合理

閾值位于指數(shù)增長期：儀器會自動計算閾值，但并非所有情況下儀器計算結(jié)果都是 合理的，必要時進行手動調(diào)整。

NTC 確認無氣溶膠污染或可以忽略

NTC = No Template Control (qPCR 反應，模板以水代替 )；

若 ΔCT=NTC (CT 值 ) - 目的基因 (CT 值 ) ≥3 或 ≥5，可認為體系中氣溶膠污染不會 影響到實驗結(jié)果的準確性。

NRT 確認無基因組殘留或可以忽略

NRT=No RT Control ( 逆轉(zhuǎn)錄反應中，除逆轉(zhuǎn)錄酶組分，其余組分正常添加 )；

若 ΔCT=NRT (CT 值 ) - 目的基因 (CT 值 ) ≥3 或 ≥5，可認為體系中基因組殘留不會 影響到實驗結(jié)果的準確性。

待測 CT 值于線性范圍內(nèi)

擴增效率符合近似計算標準

PCR 擴增效率 (e) 介于 90%-120% 之間

安培生物致力成為推動生命科學進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領域的產(chǎn)品供應線，在各個領域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu)、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術支持與服務?？梢栽诘谝粫r間為用戶提供比較先進的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務。 專業(yè)的技術力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術支持，深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴，安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產(chǎn)品推薦給國內(nèi)從事生物學領域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應商，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨，配合優(yōu)秀的銷售隊伍以及專業(yè)的技術支持，隨時為客戶提供服務