深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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血清系列
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
支原體清除
細(xì)胞凍存
實(shí)驗(yàn)耗材
分子試劑
細(xì)胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養(yǎng)基
ELISA試劑盒
TOYOBO（東洋紡）
ZYMO RESEARCH
Greiner（格瑞納）
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化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
PROSPEC系列
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微生物檢測(cè)
細(xì)胞生物學(xué)
Corning康寧
解離試劑
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
原代細(xì)胞
植物檢測(cè)系列試劑盒
SERANA
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細(xì)胞系
生化試劑盒
環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒（AKEN）
類器官培養(yǎng)
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質(zhì)
細(xì)胞因子分子
生物樣本庫(kù)
RT-PCR的靈敏度低2023/6/30
可能原因1：RNA問(wèn)題（包括：RNA被損害和降解；初始模板RNA不充分）。解決方法：如果全損害或者降解的話，更換RNA；增加模板RNA的濃度；使用10ng-1μg的總RNA?？赡茉?：儀器故障。解決...
RT-PCR的非特異信號(hào)2023/6/30
可能原因1：引物問(wèn)題（包括：引物二聚體太多）。解決方法：檢查引物設(shè)計(jì)環(huán)節(jié)和合成環(huán)節(jié)，必要時(shí)重新設(shè)計(jì)和合成引物。可能原因2：擴(kuò)增酶問(wèn)題。解決辦法：選擇hotstartTaq酶進(jìn)行擴(kuò)增，可提高靈敏度，增加...
RT-PCR的無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物2023/6/30
可能原因1：引物問(wèn)題（包括：引物設(shè)計(jì)較差，引物合成較差，引物濃度太低）。解決方法：設(shè)計(jì)引物的時(shí)候，避免在引物3'端含有互補(bǔ)序列；避免可以形成內(nèi)部發(fā)卡結(jié)構(gòu)的序列；設(shè)計(jì)Tm類似的引物。針對(duì)引物合成的問(wèn)題，...
消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法2023/6/28
非特異性擴(kuò)增，即進(jìn)行PCR所擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是所要的，引物與模板在非目的條帶處有錯(cuò)配，導(dǎo)致延伸產(chǎn)物不是目的條帶。例如引物二聚體，即引物在退火過(guò)程中產(chǎn)生了hairpin結(jié)構(gòu)或其他二級(jí)結(jié)構(gòu)，或者引物在模板...
DNA 復(fù)制需要哪些元素2023/6/28
1)需要脫氧核苷三磷酸：進(jìn)行DNA合成必須具備的2個(gè)關(guān)鍵底物之一，即4種脫氧核苷三磷酸——dGTP、dCTP、dATP、dTTP。通常商品化PCR酶會(huì)提供這4種脫氧核苷三磷酸的混合物dNTP。2)需要...
miRNA 成熟過(guò)程中的關(guān)鍵性酶和蛋白2023/6/27
RNApolymeraseII：一般認(rèn)為miRNA基因由RNApolymeraseII轉(zhuǎn)錄而來(lái)?？蓪iRNA基因轉(zhuǎn)錄成5'端蓋帽m7G和3‘端加尾polyA結(jié)構(gòu)。Drosha：Drosha蛋白為RN...
lncRNA 的生物學(xué)功能（二）2023/6/27
一）lncRNA對(duì)于細(xì)胞周期及凋亡的調(diào)控作用有研究報(bào)道，lncRNA可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和凋亡的方式，來(lái)影響細(xì)胞的增殖。例如，Gas5（growtharrest-specific5，非編碼RNA）在細(xì)...
lncRNA 的生物學(xué)功能（一）2023/5/17
（一）lncRNA對(duì)于細(xì)胞周期及凋亡的調(diào)控作用有研究報(bào)道，lncRNA可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和凋亡的方式，來(lái)影響細(xì)胞的增殖。例如，Gas5（growtharrest-specific5，非編碼RNA）在...
構(gòu)建載體2023/5/5
構(gòu)建載體最關(guān)鍵的一步就是設(shè)計(jì)引物引入酶切位點(diǎn)，一旦引物設(shè)計(jì)好，那接下來(lái)就非常簡(jiǎn)單了，今天重點(diǎn)就來(lái)教教大家如何利用snapgene輕松獲得構(gòu)建載體所需的引物序列。1.打開(kāi)軟件，選擇第一個(gè)（紅線標(biāo)記），然...
引物設(shè)計(jì)原則2023/5/5
1）擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度100bp-150bp為佳；2）引物長(zhǎng)度17bp-25bp最好；3）正向引物和反向引物的Tm值最好相差不要超過(guò)1℃。Tm值調(diào)整至60℃-65℃為佳；4）引物的GC含量控制在40%-60...
PCR 操作中必知的 6 大細(xì)節(jié)2023/5/5
1、最好使用一次性進(jìn)口tip頭，以避免液體殘留；同時(shí)，tip頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染。2、加樣時(shí)，tip頭要伸入PCR反應(yīng)管的液面下一點(diǎn)，然后將液體緩緩打入液面下，至恰好打出一個(gè)小氣...
PCR 引物設(shè)計(jì)2023/5/5
好的引物會(huì)讓PCR實(shí)驗(yàn)成功一半，因而，引物設(shè)計(jì)一直都是PCR非常重要的環(huán)節(jié)。經(jīng)典之法就是讓Premier5攜手oligo，共同設(shè)計(jì)PCR引物。1、以小鼠的IL-17為例，進(jìn)入NCBI界面,選擇Nucl...
PCR 產(chǎn)物純化2023/4/21
材料與儀器TE或去離子水PCR產(chǎn)物離心機(jī)和轉(zhuǎn)子PCR濾件微量離心管步驟一、材料1.緩沖液和溶液TE(lOmmol/LTris-HCl，lmmol/LEDTA，pH7.5)或去離子水2.核酸和寡核苷酸待...
DNA 污染的柱上去除2023/4/21
材料與儀器DNA酶I緩沖液DNA酶I細(xì)胞裂解液步驟一、材料1.酶和酶緩沖液DNA酶I，擴(kuò)增級(jí)（無(wú)RNA酶）DNA酶I緩沖液，10X2.細(xì)胞和組織利用總RNA純化試劑盒（例如Madigen總RNA快速純...
冷凍組織及切片的準(zhǔn)備2023/4/21
材料與儀器1、新鮮的組織2、丙酮蒸餾水干冰磷酸鹽緩沖液（PBS)TekOCT組織復(fù)合物3、封閉容器燒杯恒冷裝置解剖工具平盤組織模子載玻片刀片步驟一、材料1.緩沖液、溶液和試劑丙酮蒸餾水干冰磷酸鹽緩沖液...
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