細(xì)胞周期的分析

       細(xì)胞周期（cell cycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。細(xì)胞分裂期又稱M期。細(xì)胞通過M期一分為二，有的可繼續(xù)分裂進(jìn)行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細(xì)胞周期暫時(shí)停止分裂的一個(gè)階段。但在一定適宜刺激下，又可進(jìn)入周期（圖1），合成DNA與分裂。G0期的特點(diǎn)為：在未受刺激的G0細(xì)胞，DNA合成與細(xì)胞分裂的潛力仍然存在；當(dāng)G0細(xì)胞受到刺激而增殖時(shí)，又能合成DNA和進(jìn)行細(xì)胞分裂。根據(jù)各個(gè)期細(xì)胞DNA的含量將細(xì)胞周期用G0/G1期、S期和G2/M期來表示，通過核酸染料標(biāo)記，并由流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，可以得到細(xì)胞各個(gè)時(shí)期的分別狀態(tài)，計(jì)算出G0/G1期、S期和G2/M期細(xì)胞的比例，了解細(xì)胞的周期分布及細(xì)胞的增殖活性。當(dāng)然，也可以通過檢測細(xì)胞周期蛋白對細(xì)胞周期進(jìn)行精確的分期，但常用的檢測方法還是利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。細(xì)胞周期分析常用于腫瘤的早期診斷、腫瘤的良惡性判斷、觀察細(xì)胞的增殖狀態(tài)及周期分布和抗腫瘤治療的療效監(jiān)測等。

      在進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期分布的時(shí)候，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：首先，消化細(xì)胞的時(shí)候，胰酶消化的時(shí)間不宜過長，防止對細(xì)胞膜的損傷。其次，細(xì)胞樣品的采集要保證足夠的細(xì)胞濃度，以大于10⁶為宜。第三，細(xì)胞固定時(shí)，75%乙醇溶液固定效果較好，且固定時(shí)間不宜過長，固定后的細(xì)胞盡量隨即上機(jī)檢測，4℃保存時(shí)間不要過長。提前計(jì)劃好實(shí)驗(yàn)，提前預(yù)約流式細(xì)胞儀的使用時(shí)間

儀器推薦：細(xì)胞計(jì)數(shù)儀