凝膠凈化色譜的分離原理及其對載體的要求
閱讀:1605 發(fā)布時間:2022-9-6
凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法,主要用于高聚物的相對分子質(zhì)量分級分析以及相對分子質(zhì)量分布測試。
凝膠凈化色譜是用溶劑作流動相,流經(jīng)多孔填料(如多孔硅膠或多孔樹脂)作為分離介質(zhì)的液相色譜法,是液相色譜的一個分支。凝膠凈化色譜儀是一款處理大分子物質(zhì)以及高聚物的理想設(shè)備之一。
凝膠凈化的分離原理:
一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時,各分子在柱內(nèi)同時進行著兩種不同的運動:垂直向下的移動和無定向的擴散運動。
大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。
小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔中,即進入凝膠相內(nèi),在向下移動的過程中,從一個凝膠內(nèi)擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入和擴散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出。
凝膠凈化色譜儀對載體的要求有哪些?
1、良好的化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性;
2、有一定的機械強度;
3、不易變形;
4、流動阻力??;
5、對試樣沒有吸附作用;
6、分離范圍越大越好(取決于孔徑分布)等;
7、載體的粒度愈小,愈均勻,堆積的愈緊密,色譜柱分離效率愈高。