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hiPSC-U1
Biowm
經(jīng)銷商
上海市
更新時(shí)間:2025-04-02 07:18:30瀏覽次數(shù):1251次
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貨號(hào) | BWM-H-146 | 主要用途 | 科研 |
細(xì)胞介紹
的人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC-U1)是由人尿液來(lái)源人腎上皮細(xì)胞通過(guò)非整 合的方法誘導(dǎo)獲得。人 iPSC 在無(wú)飼養(yǎng)層、化學(xué)成分明確、并且無(wú)動(dòng)物源成分的 人多潛能干 細(xì)胞培養(yǎng)體系中培養(yǎng),適合臨床級(jí)的干細(xì)胞研究和應(yīng)用。人 iPSC 在人多潛能干細(xì)胞培養(yǎng) 體系中可以長(zhǎng)期穩(wěn)定快速增殖,具有高度近似人 ES 細(xì)胞的克隆形態(tài)和基因表達(dá), 長(zhǎng)期維 持正常核型,并在體內(nèi)外具有三胚層分化潛能。
一、 鋪板 1. 提前一天在4℃冰箱中解凍干細(xì)胞鋪底工作液添加劑。
2. 用預(yù)冷的移液管將鋪底工作液添加劑和鋪底工作液基礎(chǔ)液按照 1:9的比例混勻。
3. 將鋪底工作液覆蓋瓶底(6孔板1mL,依次類推),置于37℃培 養(yǎng)箱過(guò)夜。
4. 使用前,用PBS洗滌一次。 注意:可根據(jù)試劑用量將鋪底工作液添加劑分裝保存-80℃,避 免反復(fù)凍融。
二、 細(xì)胞復(fù)蘇:
1. 首先開(kāi)啟復(fù)蘇添加劑小瓶上的鋁蓋,并用酒精棉擦拭其表面, 使用注射器吸取5mL復(fù)蘇基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入到瓶中,顛倒混勻。
2. 將復(fù)蘇添加劑和復(fù)蘇基礎(chǔ)液按照0.5mL:10mL的比例混勻,配 置后的復(fù)蘇CM培養(yǎng)基保存4℃(可保存2周,可根據(jù)試劑用量將 添加劑分裝保存于-80℃,避免反復(fù)凍融)。
3. 37℃水浴中,迅速解凍細(xì)胞,用酒精棉擦拭,轉(zhuǎn)移至無(wú)菌操作 臺(tái)中。
4. 將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移至含有5mL復(fù)蘇CM培養(yǎng)基的15mL離心管中 200g離心5min。
5.棄上清,加入適量復(fù)蘇CM培養(yǎng)基,輕柔重懸細(xì)胞,接種到包被 好的培養(yǎng)瓶中。
6. 水平十字搖勻,室溫放置15min.顯微鏡下觀察大部分細(xì)胞貼壁后 ,放入5%CO 的37℃培養(yǎng)箱中。
7. 培養(yǎng)24h后,棄掉復(fù)蘇CM培養(yǎng)基,加入新鮮的干細(xì)胞CM培養(yǎng)基
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