廣州市艾貝泰生物科技有限公司

關(guān)于細(xì)胞電融合儀有什么是我們不知道的?

時間:2024-7-15 閱讀:460
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  細(xì)胞電融合儀是利用高電壓電脈沖實現(xiàn)細(xì)胞融合的生物實驗設(shè)備。細(xì)胞融合技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究和應(yīng)用領(lǐng)域具有廣泛的用途,如生產(chǎn)單克隆抗體、研究細(xì)胞分化、制備雜交瘤細(xì)胞等。
 
  基本原理:細(xì)胞電融合儀通過施加短暫的高強(qiáng)度電脈沖,導(dǎo)致細(xì)胞膜出現(xiàn)可逆的微孔,從而誘導(dǎo)細(xì)胞融合。當(dāng)細(xì)胞置于非常高的電場中,細(xì)胞膜變得具有通透性,允許外界分子擴(kuò)散進(jìn)細(xì)胞內(nèi),這一現(xiàn)象稱為電穿孔或電融合。
 
  操作方法:在實驗中,將制備的游離細(xì)胞或原生質(zhì)體置于電融合室中,然后在高頻交流電場的作用下,細(xì)胞被極化成為偶極子,并造成細(xì)胞之間相互連接??刂聘哳l交流電壓的幅值和作用時間,使兩細(xì)胞處于點接觸狀態(tài),再施加方波脈沖刺激,由于電脈沖的瞬間作用,可擊破兩細(xì)胞接觸點部位的質(zhì)膜,促使細(xì)胞融合。
 
  融合過程:細(xì)胞融合過程包括質(zhì)膜的連接與融合、胞質(zhì)合并,以及細(xì)胞核、細(xì)胞器和酶等互成混合體系。該過程可以通過施加合適的電脈沖來控制和實現(xiàn)。
 
  融合分類:細(xì)胞融合可以分為同種細(xì)胞的融合和異種細(xì)胞的融合,后者也稱為體細(xì)胞雜交。人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法包括生物法、化學(xué)法和物理法。
 
  融合變化:在細(xì)胞融合過程中,出現(xiàn)的現(xiàn)象是細(xì)胞凝集,隨后部分凝集細(xì)胞之間的膜發(fā)生粘連,并繼續(xù)發(fā)展形成多核細(xì)胞,在培養(yǎng)過程中多核細(xì)胞進(jìn)行核融合而成為單核的雜種細(xì)胞。
 
  融合劑:細(xì)胞融合可以使用不同的促融合劑,包括病毒促進(jìn)細(xì)胞融合(如仙臺病毒)、化學(xué)融合劑(如聚乙二醇PEG等)和物理方法(如電融合)來人為地促使細(xì)胞融合。
 
  需要注意的是,細(xì)胞電融合儀在進(jìn)行細(xì)胞電融合實驗時,應(yīng)適當(dāng)選擇實驗參數(shù),如電場強(qiáng)度、脈沖時長和頻率,這些因素將直接影響融合效率及細(xì)胞存活率。同時,實驗操作需在無菌條件下進(jìn)行,以避免污染風(fēng)險。
細(xì)胞電融合儀

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