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使用全自動(dòng)核酸檢測(cè)一體機(jī)怎么處理熒光污染?

閱讀:320      發(fā)布時(shí)間:2022-9-15
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  全自動(dòng)核酸檢測(cè)一體機(jī)適用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測(cè)、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)為特征的、以檢測(cè)DNA/RNA為目的的各種病原體檢測(cè)及基因分析。
 
  把一次性pcr擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,其適合退火溫度不同,通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。
 
  全自動(dòng)核酸檢測(cè)一體機(jī)在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)。熒光檢測(cè)系統(tǒng)主要包括激發(fā)光源和檢測(cè)器。激發(fā)光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器、發(fā)光二極管LED光源,前者可配多色濾光鏡實(shí)現(xiàn)不同激發(fā)波長(zhǎng),而單色發(fā)光二極管LED價(jià)格低、能耗少、壽命長(zhǎng),不過(guò)因?yàn)槭菃紊?,需要不同的LED才能更好地實(shí)現(xiàn)不同激發(fā)波長(zhǎng)。
 
  PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過(guò)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。把這基因擴(kuò)增儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
 
  對(duì)于熒光定量基因擴(kuò)增儀,當(dāng)有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來(lái)自樣品池時(shí),或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時(shí),需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無(wú)污物阻擋光路。

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