CYTOOCHIPS™ DC-S-FN X18

CYTOOchip 是一個(gè) 19.5x19.5 mm 的蓋玻片，其微圖案通過(guò)光刻技術(shù)轉(zhuǎn)移到高質(zhì)量、低熒光硼硅酸鹽玻璃上。 CYTOOchips 與所有倒置顯微鏡兼容。網(wǎng)格坐標(biāo)印在芯片的底面，使用戶(hù)能夠隨著時(shí)間的推移返回到wan全相同的單元/微圖案。這些芯片與 CYTOOchambers 結(jié)合使用時(shí)是高分辨率活細(xì)胞成像的理想選擇。

產(chǎn)品規(guī)格

參考：

10-001-10-18

圖案：

光盤(pán)

尺寸：

小 (700 µm2)

涂層：

纖連蛋白

數(shù)量

18 件套

抽象的

細(xì)胞組織成上皮取決于細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 和鄰近細(xì)胞的相互作用。細(xì)胞間粘附在上皮拓?fù)湔{(diào)節(jié)中的作用已得到充分描述。zhong所周知，ECM 可促進(jìn)細(xì)胞遷移并為細(xì)胞錨定提供結(jié)構(gòu)支架，但其對(duì)多細(xì)胞形態(tài)發(fā)生的貢獻(xiàn)卻鮮為人知。我們開(kāi)發(fā)了一個(gè)最小的模型系統(tǒng)來(lái)研究 ECM 如何影響細(xì)胞間連接的空間組織。纖連蛋白微圖案用于限制細(xì)胞-ECM 粘附的位置。我們發(fā)現(xiàn) ECM 影響細(xì)胞間連接定位的穩(wěn)定性以及細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間力的大小。細(xì)胞間連接yong久移位，只要它們靠近 ECM，就會(huì)受到很大的垂直拉力。它們僅在缺乏 ECM 的地區(qū)保持穩(wěn)定，在那里它們受到較低的張力。 ECM 空間組織的異質(zhì)性引起細(xì)胞內(nèi)機(jī)械約束的各向異性分布，這似乎會(huì)調(diào)整它們的位置以最小化細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間的力。這些結(jié)果揭示了 ECM 在細(xì)胞機(jī)械調(diào)節(jié)和細(xì)胞間連接定位中的形態(tài)發(fā)生作用。這似乎調(diào)整了它們的位置以最小化細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間的力。這些結(jié)果揭示了 ECM 在細(xì)胞機(jī)械調(diào)節(jié)和細(xì)胞間連接定位中的形態(tài)發(fā)生作用。這似乎調(diào)整了它們的位置以最小化細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間的力。這些結(jié)果揭示了 ECM 在細(xì)胞機(jī)械調(diào)節(jié)和細(xì)胞間連接定位中的形態(tài)發(fā)生作用。

上皮片位于細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 層上，即所謂的基底膜。在此類(lèi)上皮細(xì)胞中，細(xì)胞在與 ECM 接觸的細(xì)胞基底部分上建立基于整合素的粘附，并在遠(yuǎn)離與 ECM 接觸的接觸側(cè)域的頂端部分上建立基于鈣粘蛋白的細(xì)胞間粘附。兩個(gè)粘附系統(tǒng)顯示出不重疊的空間分布。細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-ECM 粘附都是建立適當(dāng)?shù)纳掀ば螒B(tài)所必需的 ( 1 )。它們都參與將外部物理信號(hào)機(jī)械轉(zhuǎn)導(dǎo)為細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)（2）。參與細(xì)胞間粘附的粘附分子的生化性質(zhì)、相互作用的能量以及沿細(xì)胞間連接產(chǎn)生的機(jī)械張力已被證明可以控制上皮細(xì)胞形狀并確定各種系統(tǒng)中細(xì)胞間連接的方向 ( 3 – 6 )。然而，雖然細(xì)胞間粘附對(duì)上皮拓?fù)涞呢暙I(xiàn)一直是許多研究的焦點(diǎn)，但對(duì) ECM 的作用的關(guān)注卻少之又少。 ECM 是一種動(dòng)態(tài)支架，在形態(tài)發(fā)生過(guò)程中主動(dòng)重塑，在刺激和引導(dǎo)細(xì)胞遷移以及定向干細(xì)胞命運(yùn)方面發(fā)揮著重要作用（7 , 8）。 ECM 還可以向上皮細(xì)胞傳遞形態(tài)調(diào)節(jié)信號(hào)，從而調(diào)節(jié)組織形態(tài)發(fā)生 ( 8 , 9 )。然而，ECM 在單細(xì)胞尺度上引導(dǎo)細(xì)胞定位的機(jī)制仍不清楚。 ECM幾何結(jié)構(gòu)已被證明可以調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu) (10) 并為細(xì)胞極化提供空間信息 (1,11,12 )，但它如何調(diào)節(jié)細(xì)胞定位并從而在空間上組織多細(xì)胞結(jié)構(gòu)仍有待研究。

結(jié)果

細(xì)胞間連接在缺乏 ECM 的區(qū)域穩(wěn)定。

通過(guò)用纖連蛋白微圖案控制 ECM 的位置，研究了 ECM 的空間分布對(duì) MCF10A 細(xì)胞間連接定位的影響 ( 13 , 14 )（SI 方法）。為了給細(xì)胞間連接提供zui大程度的自由度并盡量減少參與其定位的參數(shù)數(shù)量，我們將分析重點(diǎn)放在有絲分裂后由子細(xì)胞形成的細(xì)胞雙聯(lián)體上。在完整的細(xì)胞周期中，通過(guò)延時(shí)顯微鏡記錄細(xì)胞的位置，如細(xì)胞核的空間坐標(biāo)所示，并自動(dòng)定量（圖 S1、電影 S1和SI 方法））。我們測(cè)量了核-核軸的角度分布以及細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的時(shí)間比例。正如之前工作 ( 15 )所預(yù)期的那樣，細(xì)胞幾乎是隨機(jī)定位的，并且在方形微圖案上彼此穩(wěn)定地旋轉(zhuǎn)（圖 1 A和視頻 S2）。在這種條件下，ECM 存在于細(xì)胞雙聯(lián)體的整個(gè)輪廓上，并為細(xì)胞運(yùn)動(dòng)提供連續(xù)的外圍軌道。因?yàn)樵谏掀ぜ?xì)胞中，鈣粘蛋白傾向于從富含 ECM 的基極流向不含 ECM 的頂極（16），我們測(cè)試了 ECM 的缺失是否可以穩(wěn)定細(xì)胞間連接并干擾細(xì)胞運(yùn)動(dòng)。 [H]形微圖案被設(shè)計(jì)成提供兩個(gè)沒(méi)有ECM的大區(qū)域。與 [square] 上的行為形成鮮明對(duì)比的是，[H] 上的大部分細(xì)胞雙聯(lián)體根本不移動(dòng)，從而形成高度穩(wěn)定的構(gòu)型，其中細(xì)胞位于間隙的每一側(cè)（圖 1 B和電影） S3）。我們通過(guò)對(duì)固定細(xì)胞上的E-鈣粘蛋白進(jìn)行染色進(jìn)一步測(cè)試核軸是否垂直于細(xì)胞間連接。我們確認(rèn)細(xì)胞間連接位于不存在 ECM 的間隙上方（圖 1 D和E）。

圖 1.