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統(tǒng)計(jì)細(xì)胞器在細(xì)胞中的定位

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產(chǎn)品型號(hào)4dcell

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所  在  地北京市

更新時(shí)間:2022-03-30 17:42:13瀏覽次數(shù):158次

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統(tǒng)計(jì)細(xì)胞器在細(xì)胞中的定位
細(xì)胞在具有預(yù)定義幾何微柱陣列型拓?fù)涮卣鞯恼掣轿⒚状笮^(qū)域圖案的基底中培養(yǎng)。當(dāng)在其上培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞會(huì)特異性地粘附在圖案區(qū)域,例如獲得圖案的幾何形狀。
細(xì)胞培養(yǎng)支持物使用抗氧化抗粘附 聚合物 進(jìn)行共價(jià)結(jié)合的表面化學(xué)處理。與與載玻片具有相同類型共價(jià)鍵的經(jīng)典聚合物相比,對(duì)氧化的微圖案改進(jìn)肝細(xì)胞分化模型微圖案剛度多孔板敏感性較低。


統(tǒng)計(jì)細(xì)胞器在細(xì)胞中的定位


微圖案

控制細(xì)胞的 2D 形狀



<strong><strong>微圖案多孔板</strong></strong>微圖案96孔板和384孔板微圖案幻燈片微圖案蓋玻片動(dòng)態(tài)<strong><strong>微圖案蓋玻片</strong></strong>[動(dòng)態(tài)] 微圖案 蓋玻片<strong><strong>微圖案培養(yǎng)皿</strong></strong>微圖案35mm培養(yǎng)皿微圖案制造套件自做微圖案工具微圖案化光掩模微圖案印制石英光掩膜

技術(shù)

微圖案

細(xì)胞在具有預(yù)定義幾何特征的粘附微米大小區(qū)域圖案的基底中培養(yǎng)。當(dāng)在其上培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞會(huì)特異性地粘附在圖案區(qū)域,例如獲得圖案的幾何形狀。

細(xì)胞培養(yǎng)支持物使用抗氧化抗粘附 聚合物 進(jìn)行共價(jià)結(jié)合的表面化學(xué)處理。與與載玻片具有相同類型共價(jià)鍵的經(jīng)典聚合物相比,對(duì)氧化的敏感性較低。電鍍后,您可以將細(xì)胞保持在圖案中長達(dá) 2 周。未使用的基材可儲(chǔ)存長達(dá) 6 個(gè)月。

> 不同的圖案形狀和尺寸(線條、正方形、三角形、矩形、網(wǎng)格等)

> 定制的形狀和尺寸

> 適用于任何細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)(從培養(yǎng)皿到 384 孔板)——從單細(xì)胞到高通量和高內(nèi)涵篩選分析

> 與高分辨率光學(xué)顯微鏡系統(tǒng)兼容


動(dòng)態(tài)微圖案

Dynamic Explorer 結(jié)合了 4Dcell 的微圖案技術(shù)和點(diǎn)擊化學(xué),以誘導(dǎo)細(xì)胞從預(yù)定義的幾何形狀遷移。

細(xì)胞被播種在微圖案基板上,并以非常高的分辨率專門粘附在細(xì)胞粘附區(qū)域上。細(xì)胞周圍的區(qū)域起初是非粘性的,但可以隨時(shí)“打開"以將細(xì)胞從它們的圖案中釋放出來。

與標(biāo)準(zhǔn)微圖案一樣,可以將細(xì)胞圖案化為定制的形狀和尺寸。

> 抗粘聚合物

與載玻片共價(jià)和靜電鍵合,穩(wěn)定長達(dá) 3 個(gè)月

聚合物可以通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)變得具有粘性

微圖案原理
動(dòng)態(tài)微圖案原理

統(tǒng)計(jì)細(xì)胞器在細(xì)胞中的定位    微圖案細(xì)胞極化


細(xì)胞形狀控制和標(biāo)準(zhǔn)化、細(xì)胞器定位表征、細(xì)胞成熟和分化、遷移區(qū)域限制、細(xì)胞重編程、蛋白質(zhì)微模式等。

微圖案細(xì)胞圖

寬度為 100 到 10 ?m 的 HeLa 細(xì)胞

標(biāo)記的 4Dcell 微圖案

熒光標(biāo)記的纖維蛋白原——Alexa Fluor 488


探索應(yīng)用示例

> 肝小管試驗(yàn):改進(jìn)的肝細(xì)胞分化模型

> 井中的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò):神經(jīng)元連接的控制

> 附加球體測(cè)定:改進(jìn)球體的操作和觀察

> 2D 心肌細(xì)胞成熟試驗(yàn):功能性 IPSc 誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞纖維

> 心肌細(xì)胞成熟試驗(yàn):功能性 IPSc 誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞纖維

> 細(xì)胞遷移測(cè)定:遷移  過程中發(fā)生的機(jī)制分析

> 細(xì)胞極化:細(xì)胞  形狀和組織的標(biāo)準(zhǔn)化

> 共培養(yǎng)測(cè)定:通過點(diǎn)擊化學(xué)技術(shù)分析細(xì)胞-細(xì)胞接觸

> 受挫的吞噬作用:機(jī)制的表征

> 片狀偽足和絲狀偽足檢測(cè):分析膜突出期間發(fā)生的事件

> 活細(xì)胞成像:通過延時(shí)顯微鏡觀察細(xì)胞

> 巨噬細(xì)胞極化測(cè)定:通過細(xì)胞形狀調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞表型

> 微管依賴性運(yùn)輸測(cè)定:細(xì)胞骨架組織的細(xì)胞限制

> 細(xì)胞器定位分析:統(tǒng)計(jì)細(xì)胞器在細(xì)胞中的定位

> 初級(jí)纖毛測(cè)定:纖毛發(fā)生調(diào)控的細(xì)胞形狀控制

> 骨骼肌細(xì)胞測(cè)定:排列、組織和形狀標(biāo)準(zhǔn)化

> 抗粘聚合物

與載玻片共價(jià)和靜電鍵合,穩(wěn)定長達(dá) 3 個(gè)月

聚合物可以通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)變得具有粘性


Dynamic Explorer 結(jié)合了 4Dcell 的微圖案技術(shù)和點(diǎn)擊化學(xué),以誘導(dǎo)細(xì)胞從預(yù)定義的幾何形狀遷移。

細(xì)胞被播種在微圖案基板上,并以非常高的分辨率專門粘附在細(xì)胞粘附區(qū)域上。細(xì)胞周圍的區(qū)域起初是非粘性的,但可以隨時(shí)“打開"以將細(xì)胞從它們的圖案中釋放出來。

動(dòng)態(tài)微圖案技術(shù)

在使用動(dòng)態(tài)微圖案的典型實(shí)驗(yàn)中,可以使用實(shí)時(shí)成像工具或通過在不同時(shí)間點(diǎn)獲取圖像來實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞遷移。然后對(duì)圖像進(jìn)行處理和分析,以確定細(xì)胞占據(jù)的基板面積作為時(shí)間的函數(shù)。

微圖案上的細(xì)胞遷移



數(shù)據(jù)分析

通過測(cè)量細(xì)胞隨時(shí)間占據(jù)的面積來量化細(xì)胞遷移率。

先,使用 imageJ 內(nèi)置的“滾動(dòng)球"算法從圖像中減去背景。這可以增強(qiáng)細(xì)胞和背景之間的對(duì)比度并糾正不均勻的照明。

使用“ColorToGray"CellProfiler 模塊將圖像轉(zhuǎn)換為灰度圖像。然后將“平滑"模塊應(yīng)用于灰度圖像以去除偽影。接下來,依次應(yīng)用了“IdentifyPrimaryObjects"和“MeasureImageAreaOccupied"模塊。個(gè)將圖像上的特征分為兩類:對(duì)象和背景,其中單元格對(duì)應(yīng)于對(duì)象。后者測(cè)量圖像上先前計(jì)算的對(duì)象所占據(jù)的面積。 


探索應(yīng)用示例

> 如何使用圖像處理通過 4DCELL 測(cè)定法測(cè)量圓盤狀細(xì)胞遷移?

> 如何使用圖像分析測(cè)量傷口隨時(shí)間的閉合情況?

技術(shù)概述

> 使用微模式模擬心肌收縮

> 由微圖案蛋白質(zhì)底物引導(dǎo)的細(xì)胞遷移

> 神經(jīng)組織工程:基質(zhì)剛度調(diào)節(jié)神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的形成和活動(dòng)

> 回顧 – 微圖案


微圖案形狀

 

磁盤

線條

三角形

正方形

矩形

網(wǎng)格

 

或者您可以要求定制形狀。

 

標(biāo)準(zhǔn)微圖案尺寸從10 µm 到 100 µm。


傷口愈合試驗(yàn)

該方法計(jì)算圖像上單元格所占的面積。隨著細(xì)胞隨時(shí)間遷移,細(xì)胞占據(jù)的面積增加,傷口區(qū)域變小,直到*被細(xì)胞覆蓋。該方法使用 CellProfiler,這是一個(gè)免費(fèi)的、基于 python 的開源軟件,用于生物圖像分析。請(qǐng)注意,也可以使用其他軟件或從頭開始編寫程序來執(zhí)行分析。 




















































































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