產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素酶聯(lián)免疫分析試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素水平。用純化的產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素,再與HRP標(biāo)記的產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素濃度。
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