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液相色譜儀組成之分離柱
閱讀：1070 發(fā)布時(shí)間：2015-12-29
擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是液相色譜儀的心臟，柱效高、選擇性好、分析速度快是對(duì)色譜柱的一般要求。商品化HPLC微粒填料，粒度通常為3µm、5µm、7µm及10µm。超高壓液相色譜中采用的固定相粒度甚至可以小到1µm，而制備色譜所采用的固定相粒度通常大于10µm。
填充HPLC柱柱效的理論值可達(dá)到每米50000~160000理論塔板數(shù)。每米5000理論塔板數(shù)柱效的色譜柱即可滿足一般樣品分析的要求。較難分離的樣品可能需每米20000理論塔板數(shù)柱效的柱子，因此采用100~300mm的柱長(zhǎng)就能滿足大多數(shù)樣品分析的需要。
液相色譜柱可依柱徑大致分為三種類型：內(nèi)徑小于2mm的稱為細(xì)管徑柱或微管徑柱；內(nèi)徑在2~5mm的是常規(guī)液相色譜柱；內(nèi)徑大于5mm的稱為半制備柱或制備柱。細(xì)管徑柱中流動(dòng)相流量小，體積峰寬隨之減少，也減小了對(duì)樣品的稀釋，有利于提高峰高靈敏度。另一方面，細(xì)管徑柱柱體積小，柱外效應(yīng)的影響將不容忽視，需要配備更小池體積的檢測(cè)器和小流量泵，對(duì)柱接頭、連接管以及進(jìn)樣設(shè)備也有更高要求。