植物硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA檢測試劑盒 返回列表頁

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植物硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA檢測試劑盒配置如下：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、30、60、120、240、480 pg/mL

植物樣本處理方案：新鮮植物組織請?jiān)谝旱谐浞盅心ィ鐭o液氮，剪碎，玻璃勻漿器研磨也可； 加入樣品體積9倍（鮮重：勻漿液體積）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；請于4℃ ，3000rpm，離心10min，收集上清； 取上清檢測。

注：標(biāo)本均應(yīng)密封保存，短期內(nèi)使用（1周左右），可4度保存；若樣本收集與實(shí)驗(yàn)時(shí)間相隔較長，務(wù)必保存在-20或-80度，盡量不要超過半年，同時(shí)避免反復(fù)凍融。

植物硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA檢測試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。