人白細胞介素1β (IL-1β)ELISA檢測試劑盒 返回列表頁

【白細胞介素1β(IL-1β)簡介】：又稱白細胞熱原、白細胞內(nèi)源性介質(zhì)、單核細胞因子、淋巴細胞激活因子等名稱，是一種細胞因子蛋白，由IL1B基因編碼。白細胞介素1（IL-1）有兩種基因，IL-1α和IL-1β（本基因）。IL-1β前體被細胞膜caspase 1（白細胞介素1 beta轉(zhuǎn)化酶）裂解，形成成熟的IL-1β。它與IL-23結(jié)合，誘導γδT細胞表達IL-17、IL-21和IL-22，這種誘導表達是在沒有額外信號的情況下進行的，這表明它參與了自身免疫性炎癥的調(diào)控。

上海軒澤康生物有限公司提供的產(chǎn)品：人白細胞介素1β (IL-1β)ELISA檢測試劑盒，是僅供科研使用，不用于臨床診斷。試劑盒規(guī)格：48T/盒可以檢測42個樣本；96T/盒可以檢測90個樣本。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被白細胞介素1β（IL-1β）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素1β（IL-1β）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 實驗需自備物品：

1.      酶標儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

人白細胞介素1β (IL-1β)ELISA檢測試劑盒性能：

1.  準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2.  靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

技術(shù)小提示：

1.      當混合或重溶蛋白溶液時，盡量避免起沫。

2.      為了避免交叉感染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3.      每次孵育時，請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準確性。

4.      混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍色。

5.      終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍變黃；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請充分混合。

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