ALT酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒檢測前準備工作：1. 請?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。可將 20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml 工作濃度的洗滌液，未用完的放回 4℃3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份 20×洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水。試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被（ALT）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的（ALT）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

ALT酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒的注意事項：

1） 充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果很重要，在加液后請輕輕晃動整個96板孔，以保證混勻。

2） TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬，否則容易失效。

3） 加樣時請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產(chǎn)生。

4） 檢測標準品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。

5） 洗滌過程非常重要，洗滌不充分會下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。