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胎牛血清
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CCK8
RNA提取試劑
B27
潮霉素B
L-谷氨酰胺
BIOEXPLORER ECL化學(xué)底物發(fā)光液
實(shí)驗(yàn)室儀器

胎牛血清使用中常見(jiàn)問(wèn)題的解答

時(shí)間:2023/7/24閱讀:486
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   胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。

南美胎牛血清

  胎牛血清使用中常見(jiàn)問(wèn)題的解答:
  1、問(wèn):加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎?
  答:不是必須的,看做什么實(shí)驗(yàn)了。
  2、問(wèn):胎牛血清滅活是56℃ 30分鐘嗎?
  答:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長(zhǎng)因子。 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞,血清是 需要滅活,一般是56℃,30min。
  3、問(wèn):我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng),胎牛血清要滅活嗎?
  答:進(jìn)口的一般都已滅活,國(guó)產(chǎn)的不一定,盡量還是滅活一下再用較安全。
  4、問(wèn):我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?
  因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體,是不是會(huì)影 響轉(zhuǎn)染?我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會(huì)和病毒相結(jié)合,影響 轉(zhuǎn)染,正確嗎?細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞, 病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí),目的是什么?
  答:血清一定要滅活,可以先用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清。避免雜蛋白對(duì)病毒和宿主 結(jié)合過(guò)程的干擾,一般是2-6小時(shí),根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需 要滅活,滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活 !這要根據(jù)實(shí)際情況而定,如果沒(méi)有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個(gè)小時(shí)。
  5、問(wèn):因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室水浴鍋失控,血清滅活時(shí),溫度到了61.7℃,這血清還能用嗎?
  答:多長(zhǎng)時(shí)間啊?短時(shí)間應(yīng)該可以吧,我有一次加熱了一個(gè)多小時(shí),還照樣用。
  6、問(wèn):我滅活胎牛血清時(shí),用的電磁爐,定在了70℃,本來(lái)說(shuō)調(diào)溫度到56℃再放血清的,后來(lái)忘了,就把 血清放進(jìn)去了,所以滅活的溫度肯定超過(guò)56℃了,不知道這樣對(duì)血清 有沒(méi)有影響?
  答:常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等,其中常用的手法是56℃ 熱處理30分鐘??纯茨沭B(yǎng)的細(xì)胞是什么,一般的話(huà)估計(jì)問(wèn)題不大,要是 很珍貴的細(xì)胞還是慎重一點(diǎn)啊。熱滅活目的是 為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì), 在對(duì)補(bǔ)體滅活以外,熱處理同時(shí)也對(duì)血清中可能存在的支原體具有滅活作 用?,F(xiàn)在好像不主張熱 滅活,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來(lái)負(fù)面影響,對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,此外 ,有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用。
  胎牛血清主要用途:
  牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
  1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
  2. 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
  3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
  4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
  5.起酸堿度緩沖液作用。
  6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

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