高糖培養(yǎng)基不含酚紅是一種廣泛用于支持許多不同哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。在DMEM中成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括原代成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、HUVECs和平滑肌細(xì)胞,以及HeLa、293、cos7和PC-12等細(xì)胞系。
高糖培養(yǎng)基里面的葡萄糖怎么加?
方法/步驟
1。與葡萄糖相比,蔗糖有如下優(yōu)點(diǎn):蔗糖是淀粉合成的前體物質(zhì)。在植物組織培養(yǎng)中蔗糖是較理想的碳源之一,其作用是作為碳源和維持滲透壓。相關(guān)報(bào)道表明蔗糖對(duì)一些重要酶的基因表達(dá)及部分貯藏蛋白積累都具有重要影響。如高濃度蔗糖可誘導(dǎo)淀粉結(jié)合淀粉合成酶(GBSS)基因的表達(dá)。
2.首先要明白葡萄糖是二糖,也就是一個(gè)乳糖和另一個(gè)單糖縮合而成,所以當(dāng)你高溫高壓滅菌時(shí),葡萄糖會(huì)分解。
3.植物細(xì)胞培養(yǎng)中較常用的培養(yǎng)基的碳源是蔗糖,已知葡萄糖和果糖也能使某些植物生長(zhǎng)得很好。
4.如果你是搖瓶培養(yǎng)的話,就按培養(yǎng)基成分進(jìn)行配制,在115℃,15min或者20min,都可以,如果是上罐的話,建議你分開滅菌,就是先把培養(yǎng)基的其他成分都配好,直接滅菌,葡萄糖單獨(dú)滅菌,然后在通過蠕動(dòng)泵加入 3如果你的培養(yǎng)基中有一些天然成分,比如玉米漿等,工業(yè)上會(huì)采用121℃,這樣做是為了使培養(yǎng)基滅透,不至于染菌。
5.蔗糖是可以直接進(jìn)入細(xì)胞的、甘露糖和乳糖等.實(shí)在要添加葡萄糖那么滅菌溫度一般控制在108~110左右,120度滅出來的就有一定程度的碳化了.葡萄糖更不穩(wěn)定,蔗糖跨質(zhì)膜從質(zhì)外體進(jìn)入細(xì)胞是由載體介導(dǎo)并需要消耗能量的質(zhì)子-蔗糖共運(yùn)輸機(jī)制進(jìn)行的半乳糖
6.雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是主動(dòng)運(yùn)輸。
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