一、色譜柱再生：恢復(fù)分離效能的關(guān)鍵步驟
凝膠色譜柱長期使用后，可能因樣品殘留或微生物污染導(dǎo)致柱效下降。再生流程需根據(jù)污染物類型選擇方法：
有機物污染：用純甲醇或乙腈以0.5mL/min流速沖洗2-4小時，置換凝膠孔隙中的疏水雜質(zhì)。
鹽沉積或蛋白質(zhì)污染：采用階梯式?jīng)_洗法，先用50%乙腈+0.1%TFA）沖洗1小時，再換用0.1MNaOH溶液沖洗2小時（需確認色譜柱耐受pH），最后用純水平衡至中性。
再生后驗證：注射標準樣品（如聚乙二醇或藍葡聚糖），對比再生前后保留時間與峰形，若理論塔板數(shù)恢復(fù)至初始值的80%以上，則再生成功。
二、泵密封更換：保障流速穩(wěn)定的核心操作
泵密封磨損會導(dǎo)致漏液或壓力波動，需定期更換：
更換時機：若發(fā)現(xiàn)泵頭有液體滲出、壓力不穩(wěn)定或流速誤差超過±2%，需立即更換密封圈。
操作步驟：關(guān)閉儀器電源，排空系統(tǒng)壓力；拆卸泵頭，取出舊密封圈（注意方向）；用異丙醇清潔密封槽，安裝新密封圈并涂抹硅脂潤滑；重新組裝后，用純水以0.1mL/min流速排氣泡，逐步升至目標流速。
注意事項：避免使用尖銳工具觸碰密封圈，防止劃傷；更換后需運行至少30分鐘，觀察壓力是否穩(wěn)定。
三、基線校準：確保數(shù)據(jù)準確性的基礎(chǔ)
基線漂移或噪聲過高會影響定量結(jié)果，需定期校準：
校準前準備：用純流動相沖洗系統(tǒng)至基線穩(wěn)定（通常需2-4小時），確保檢測器池溫度與柱溫一致。
校準方法：進入儀器軟件“基線校準”模塊，采集空白溶劑信號，自動扣除背景噪聲；若手動校準，需記錄基線偏移值，在數(shù)據(jù)分析時修正。
維護建議：每月檢查一次基線穩(wěn)定性，若噪聲＞0.5mAU（UV檢測器）或漂移＞0.1mAU/min，需清洗檢測器流通池或更換氘燈。
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