國(guó)產(chǎn)凝膠凈化系統(tǒng)的核心依托于凝膠過(guò)濾色譜技術(shù)。凝膠作為一種具有特殊三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的介質(zhì)，其內(nèi)部存在著大量不同孔徑的孔隙。當(dāng)樣品混合物隨著洗脫液流入裝有凝膠的色譜柱時(shí)，一場(chǎng)基于分子大小差異的“分離大戲”就此展開(kāi)。
 

　　較大分子量的物質(zhì)由于體積龐大，無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的微小孔隙，只能沿著凝膠顆粒之間的空隙，以較快的速度向下遷移，先被洗脫出色譜柱。而較小分子量的物質(zhì)則能夠順利地進(jìn)入凝膠內(nèi)部的孔隙之中，在孔隙內(nèi)不斷擴(kuò)散、徘徊，行進(jìn)路徑變得曲折且漫長(zhǎng)，因而被洗脫出來(lái)的時(shí)間相對(duì)較晚。通過(guò)這種巧妙的方式，不同分子量大小的物質(zhì)得以在色譜柱中實(shí)現(xiàn)分離，進(jìn)而達(dá)到凈化、提純樣品的目的。例如在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中，目標(biāo)蛋白質(zhì)若處于特定分子量范圍，就能利用凝膠凈化系統(tǒng)準(zhǔn)確地將其從復(fù)雜的混合體系中分離出來(lái)，去除那些分子量過(guò)大或過(guò)小的雜質(zhì)蛋白、多糖等成分。
 

　　國(guó)產(chǎn)凝膠凈化系統(tǒng)的使用注意事項(xiàng)：
 

　　1.環(huán)境要求：安裝本儀器的實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)水平、穩(wěn)固，并具有足夠的放置空間。避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強(qiáng)磁場(chǎng)的地方安裝本儀器，否則將會(huì)影響儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)及縮短儀器的使用壽命。實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)控制在15℃ -30℃范圍內(nèi)，并且波動(dòng)要小；濕度在45 -80范圍內(nèi)。由空調(diào)或其他設(shè)備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器，避免光線(xiàn)直射及振動(dòng)。
 

　　2.流動(dòng)相管理：流動(dòng)相的純度要求高，建議使用色譜純及以上級(jí)別的流動(dòng)相，并使用0.45μm的濾膜過(guò)濾，超聲脫氣混合均勻，以去除雜質(zhì)和氣泡，保證系統(tǒng)正常運(yùn)行。同時(shí)，要根據(jù)凝膠凈化色譜柱的規(guī)格要求配置相應(yīng)的流動(dòng)相，嚴(yán)格按照規(guī)定的比例進(jìn)行配置，避免使用不合適的流動(dòng)相對(duì)色譜柱造成損害。流動(dòng)相每次配制要適量，如果放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，需重新配制。
 

　　3.樣品處理：樣品濃度要適中，過(guò)高可能導(dǎo)致柱超載，使分離效果變差；過(guò)低則可能降低檢測(cè)靈敏度，增加檢測(cè)誤差。樣品在進(jìn)樣前必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，如過(guò)濾、脫水等，以防止雜質(zhì)堵塞色譜柱或影響分離效果。
 

　　4.儀器維護(hù)：每次使用后要用適當(dāng)?shù)那鍧嵰呵逑磧x器，并用干凈無(wú)菌的紙巾擦干，不可使用有機(jī)溶劑或強(qiáng)酸堿等腐蝕性物質(zhì)清洗。同時(shí)，也應(yīng)定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)和測(cè)試，確保儀器正常使用。出現(xiàn)故障時(shí)，應(yīng)由專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行檢修或更換備品備件。
 

　　5.操作規(guī)范：在連接系統(tǒng)的PEEK接頭時(shí)，適當(dāng)擰緊即可，過(guò)度用力會(huì)造成螺紋損壞。嚴(yán)禁使用酸、堿性流動(dòng)相，嚴(yán)禁使用水作為流動(dòng)相，嚴(yán)禁使用緩沖鹽。