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泛素蛋白連接酶E1抗體

1.特異性——免疫原

用于產生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質量差的免疫原產生的抗體將導致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結果。應注意選擇針對已充分表征的免疫原產生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質的類似三級結構。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產生的抗體可用作蛋白質印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質

如果將純化的蛋白質用作免疫原，則針對它們產生的抗體可能無法識別蛋白質印跡中變性蛋白質的線性表位。一些使用天然蛋白質產生的抗體只能識別蛋白質表面的天然氧化構象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

The ubiquitin (Ub) pathway involves three sequential enzymatic steps that facilitate the conjugation of Ub and Ub-like molecules to specific protein substrates.

1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質。可以刺激異種動物產生抗 Ig 血清，

經適當提取后，產生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數的間接標記反應中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑

體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶-2（HEME OXYGENASE-2）活性熒光定量檢測試劑盒

動物糖蛋白刀豆蛋白A（ConA）樹脂法純化試劑盒

可溶性真菌/酵母細胞膜蛋白（粗提）制備試劑盒

EGFR 蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒

通用型副傷A（Salmonella Paratyphi A）定性基因檢測試劑盒

前列腺腫瘤CAG三聯(lián)子定量試劑盒

真菌/酵母鈣鎂ATP酶（Ca＋＋/Mg＋＋ －ATPase）活性比色法定量

純化線粒體氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法

間接染色試劑盒

植物亮氨基肽酶（leucine aminopeptidase；LAP）

石蠟切片組織CDK6蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

燕麥β-葡聚糖含量化學比色法定量檢測試劑盒

非同位素HRP化學發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒

組織丙酮酸激酶（PK）總活性比色法定量檢測試劑盒

植物活性線粒體分離試劑盒

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