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新型快速免染PAGE凝膠制備試劑盒(1.0 mm 6塊裝)是一種創(chuàng)新的實(shí)驗(yàn)工具,專(zhuān)為高效、便捷地進(jìn)行蛋白質(zhì)電泳分析而設(shè)計(jì)。這種試劑盒不僅簡(jiǎn)化了聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)的制備過(guò)程,還具備免染技術(shù),使得在電泳結(jié)束后無(wú)需進(jìn)行傳統(tǒng)的染色步驟即可直接觀察到蛋白質(zhì)條帶。該試劑盒的推出大大提高了實(shí)驗(yàn)室蛋白質(zhì)分析的效率,適用于各種蛋白質(zhì)研究和生物分子分析應(yīng)用。
1. 免染PAGE技術(shù)概述
傳統(tǒng)的PAGE分析通常需要在電泳結(jié)束后通過(guò)考馬斯亮藍(lán)染色、銀染或其他染色方法來(lái)可視化蛋白質(zhì)條帶。這些染色步驟通常耗時(shí)且需多次洗脫處理。而免染技術(shù)(Stain-Free Technology)利用的是熒光化學(xué)物質(zhì)與蛋白質(zhì)中的特定基團(tuán)反應(yīng),形成在紫外光下發(fā)出熒光的產(chǎn)物。通過(guò)使用免染PAGE凝膠,研究人員可以在電泳完成后立即在紫外光下觀測(cè)到蛋白質(zhì)條帶,從而省去了繁瑣的染色步驟。
2. 試劑盒的組成
新型快速免染PAGE凝膠制備試劑盒(1.0 mm 6塊裝)通常包含以下組件:
免染丙烯酰胺/雙丙烯酰胺溶液:預(yù)配制的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺溶液,已含有免染化學(xué)物質(zhì),確保在電泳后蛋白質(zhì)條帶的可視化。
分離膠緩沖液:專(zhuān)為蛋白質(zhì)分離設(shè)計(jì)的緩沖液,優(yōu)化的pH和離子濃度有助于提高蛋白質(zhì)分辨率。
濃縮膠緩沖液:用于制備濃縮膠,確保樣品在進(jìn)入分離膠前的集中。
APS(過(guò)硫酸銨):作為聚合反應(yīng)的引發(fā)劑,與TEMED共同作用,促進(jìn)凝膠的快速固化。
TEMED:N,N,N',N'-四甲基乙二胺,催化丙烯酰胺的聚合反應(yīng)。
玻璃板和梳子:適用于1.0 mm厚度的PAGE凝膠,確保樣品加樣槽的均勻性和重復(fù)性。
3. 主要特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
3.1 快速制備和高效電泳
該試劑盒提供了預(yù)混合的丙烯酰胺溶液,極大簡(jiǎn)化了凝膠的制備過(guò)程。實(shí)驗(yàn)人員只需將各組分按比例混合,即可快速制備凝膠。與傳統(tǒng)的PAGE相比,新型快速免染PAGE凝膠的制備過(guò)程更加簡(jiǎn)單且耗時(shí)更少。
3.2 免染技術(shù)的便捷性
免染技術(shù)是該試劑盒的一大亮點(diǎn)。通過(guò)在凝膠中引入免染化學(xué)物質(zhì),蛋白質(zhì)在電泳后能夠直接在紫外光下發(fā)出熒光,無(wú)需進(jìn)一步染色和脫色處理。這一特性大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,使得研究人員能夠更快地獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3.3 高靈敏度和高分辨率
免染PAGE凝膠能夠分離并檢測(cè)到低至納克級(jí)的蛋白質(zhì)量,適用于分析低豐度的蛋白質(zhì)。凝膠的高分辨率設(shè)計(jì)保證了蛋白質(zhì)條帶的清晰可見(jiàn),有助于精確的分子量測(cè)定和蛋白質(zhì)純度分析。
3.4 適用廣泛
該試劑盒適用于各種蛋白質(zhì)電泳分析,包括但不限于蛋白質(zhì)純化分析、酶活性檢測(cè)、蛋白質(zhì)修飾研究以及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究。無(wú)論是科研實(shí)驗(yàn)室還是工業(yè)應(yīng)用,都可以通過(guò)該試劑盒獲得可靠的結(jié)果。
4. 應(yīng)用領(lǐng)域
4.1 蛋白質(zhì)分離和分析
在蛋白質(zhì)研究中,免染PAGE凝膠尤其適合快速分離和分析蛋白質(zhì)樣品。研究人員可以在電泳完成后立即觀測(cè)蛋白質(zhì)分布,極大地提高了實(shí)驗(yàn)的效率和可靠性。這對(duì)于需要高通量篩選或快速結(jié)果的實(shí)驗(yàn)尤為重要。
4.2 定量蛋白質(zhì)分析
免染技術(shù)允許研究人員直接在電泳后進(jìn)行蛋白質(zhì)的定量分析。通過(guò)配備合適的圖像分析軟件,熒光信號(hào)可以被準(zhǔn)確量化,用于比較不同樣品中蛋白質(zhì)的相對(duì)含量。這在研究蛋白質(zhì)表達(dá)水平變化、蛋白質(zhì)降解等過(guò)程中具有重要意義。
4.3 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究
在研究蛋白質(zhì)復(fù)合物或多亞基蛋白質(zhì)的相互作用時(shí),免染PAGE凝膠可以提供高分辨率的分離效果,幫助研究人員識(shí)別和分析相互作用的蛋白質(zhì)組分。
5. 使用步驟
使用新型快速免染 PAGE凝膠制備試劑盒的典型操作步驟如下:
制備分離膠:將免染丙烯酰胺溶液與分離膠緩沖液混合,加入APS和TEMED,混合均勻后倒入玻璃板之間,注入適量的正丁醇覆蓋,避免空氣接觸。待分離膠固化后,倒掉正丁醇。
制備濃縮膠:將免染丙烯酰胺溶液與濃縮膠緩沖液混合,加入APS和TEMED,攪拌均勻后倒在已固化的分離膠上,插入梳子,等待凝膠固化。
樣品加樣和電泳:凝膠固化后,移除梳子,安裝電泳槽,將準(zhǔn)備好的樣品加入樣品槽,連接電源開(kāi)始電泳。
蛋白質(zhì)檢測(cè):電泳完成后,使用紫外光源直接觀測(cè)蛋白質(zhì)條帶的熒光信號(hào),無(wú)需進(jìn)行傳統(tǒng)染色步驟。
結(jié)果分析:通過(guò)凝膠成像系統(tǒng)獲取圖像,并使用相應(yīng)軟件對(duì)蛋白質(zhì)條帶進(jìn)行分析和定量。
6. 注意事項(xiàng)
避免光暴露:由于免染技術(shù)依賴(lài)熒光物質(zhì),在操作過(guò)程中應(yīng)盡量避免凝膠過(guò)早暴露在紫外光下,以免降低熒光信號(hào)的強(qiáng)度。
溫度控制:在凝膠聚合過(guò)程中,應(yīng)控制環(huán)境溫度,避免過(guò)高或過(guò)低的溫度影響聚合效果和凝膠質(zhì)量。
安全防護(hù):處理丙烯酰胺溶液時(shí),務(wù)必佩戴防護(hù)手套和眼鏡,以避免皮膚接觸和吸入蒸汽。
7. 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用實(shí)例
在癌癥研究中,研究人員經(jīng)常使用免染PAGE凝膠分析腫瘤細(xì)胞中蛋白質(zhì)表達(dá)的變化。通過(guò)該試劑盒,實(shí)驗(yàn)者可以快速分離并檢測(cè)到關(guān)鍵的癌癥標(biāo)志物蛋白,進(jìn)而進(jìn)行功能研究或篩選潛在的藥物靶點(diǎn)。
在生物制藥中,該試劑盒被用來(lái)評(píng)估藥物生產(chǎn)過(guò)程中蛋白質(zhì)的純度和一致性。免染技術(shù)不僅縮短了分析時(shí)間,還提高了檢測(cè)的靈敏度和可靠性,有助于保證藥物的質(zhì)量和安全性。
8. 總結(jié)
新型快速免染 PAGE凝膠制備試劑盒(1.0 mm 6塊裝)是一種功能強(qiáng)大的實(shí)驗(yàn)工具,專(zhuān)為現(xiàn)代蛋白質(zhì)研究的高效需求設(shè)計(jì)。通過(guò)簡(jiǎn)化凝膠制備過(guò)程和引入免染技術(shù),該試劑盒顯著提高了實(shí)驗(yàn)效率,減少了傳統(tǒng)電泳分析的時(shí)間和操作步驟。其高靈敏度、高分辨率的特點(diǎn),使其成為科研實(shí)驗(yàn)和工業(yè)應(yīng)用中的理想選擇。無(wú)論是在基礎(chǔ)研究還是應(yīng)用開(kāi)發(fā)中,該試劑盒都為蛋白質(zhì)分析提供了更快捷、可靠的解決方案。