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聚乙二醇-聚乙烯亞胺介導小干擾RNA體外轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細胞的研究

閱讀:904          發(fā)布時間:2013-10-25
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作者:梁嫣然 劉中霖 畢偉 帥心濤 王偉偉 陶恩祥

 

510120 廣州,中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科梁嫣然、劉中霖、陶恩祥510275 廣州,中山大學化學與化學工程學院帥心濤、王偉偉;510630 廣州,暨南大學附屬*醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科畢偉

 

摘要:目的 研究聚乙二醇-聚乙烯亞胺(PEG-PEI)作為非病毒納米載體介導小干擾RNA(siRNA) 體外轉(zhuǎn)染C17.2 NSCs的效果。 方法 采用自行設計合成的PEG-PEI與靶向Nogo 受體復合體基因的siRNA 形成復合物,通過粒徑與電位的測定、凝膠阻滯電泳實驗等方法觀察PEG-PEI/siRNA納米復合物的表征及復合效果。以脂質(zhì)體復合體系Lipofectamine 2000/siRNA 為對照,采用流式細胞儀檢測不同N/P (PEG-PEI 中氮原子和siRNA 中磷原子的摩爾比PEG-PEI/siRNA復合物對NSCs的轉(zhuǎn)染效率。 結(jié)果 PEG-PEIsiRNA形成粒徑為納米級別的復合物袁隨著N/P比增大,復合物的粒徑逐漸減小,而表面電位逐漸增大。凝膠阻滯電泳實驗表明siRNA PEG-PEI可以通過靜電相互作用而穩(wěn)定結(jié)合。流式細胞儀檢測細胞轉(zhuǎn)染率后發(fā)現(xiàn),N/P=15時,PEG-PEI/siRNA復合物轉(zhuǎn)染率zui高,可達(78.728.18)%。 結(jié)論 PEG-PEI 是一種有良好發(fā)展前景的非病毒型siRNA 轉(zhuǎn)運載體,對神經(jīng)干細胞基因治療具有潛在的應用價值。

 

關鍵詞:神經(jīng)干細胞;轉(zhuǎn)染;共聚物;載體

 

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