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角分辨散射儀是以特定頻率入射光照射這些粒子，它們不吸收入射光能量，而僅作為二次波源向各個(gè)方向發(fā)射與入射光頻率相同的球面散射光，這種沒(méi)有頻率位移（即無(wú)能量變化）的散射稱為彈性光散射（elastic light scattering），也常稱為經(jīng)典光散射（classical light scattering）、靜態(tài)光散射（static light scattering）在靜態(tài)光散射情況下，通常用來(lái)表征一個(gè)體系的散射能力和角度依賴性。
角分辨散射儀譜操作規(guī)程：
1、開(kāi)機(jī)前準(zhǔn)備：水：蒸餾水，有機(jī)溶劑：色譜純。緩沖鹽溶液：配置完成后過(guò)2層0.22um濾膜。流動(dòng)相需準(zhǔn)備充足。
2、系統(tǒng)平衡：根據(jù)需要選擇凝膠柱以及需要連接的檢測(cè)器。開(kāi)啟脫氣機(jī)，泵、柱溫箱、檢測(cè)器以及電腦開(kāi)關(guān)。點(diǎn)擊quick start pump進(jìn)行流速設(shè)置，點(diǎn)擊ASTRA進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方法設(shè)置。提前24小時(shí)將流速調(diào)至試驗(yàn)所需流速進(jìn)行系統(tǒng)平衡，其中注意流動(dòng)相過(guò)渡問(wèn)題，待檢測(cè)器沖平后可進(jìn)行進(jìn)樣分析。
3、進(jìn)樣：建議標(biāo)準(zhǔn)樣品歸一化處理，用于激光18角度校正，建議進(jìn)樣前進(jìn)行該處理。多糖需用3-5mg/mL分子量為五萬(wàn)以下的右旋糖酐進(jìn)行激光，蛋白質(zhì)以2-4mg/mL的BSA作為歸一化樣品。所以樣品離心后取上層清液過(guò)0.45um濾膜。手動(dòng)進(jìn)樣器扳至load狀態(tài)進(jìn)行進(jìn)樣，一般需進(jìn)3-5倍進(jìn)樣環(huán)體積以清洗進(jìn)樣環(huán)，點(diǎn)擊軟件中運(yùn)行后將進(jìn)樣器扳至Inject狀態(tài)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集。
4、數(shù)據(jù)分析：數(shù)據(jù)采集后需進(jìn)行定基線、峰等數(shù)據(jù)處理，依據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提前實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)可以通過(guò)圖表中郵件中edit進(jìn)行數(shù)據(jù)導(dǎo)出。
5、關(guān)機(jī)：色譜柱和系統(tǒng)清洗-流動(dòng)相沖洗2-3個(gè)小時(shí)，根據(jù)流動(dòng)相性質(zhì)選擇合適溶劑過(guò)渡，如緩沖鹽流動(dòng)相沖洗后需用萬(wàn)分之二疊代鈉清洗一晚上后換20%甲醇沖洗足夠時(shí)間后，進(jìn)行色譜柱保存，關(guān)閉儀器電源。實(shí)驗(yàn)完成后做好登記工作。
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