佰利萊生物教您選購大鼠ELISA試劑盒后需注意哪些

2.實驗
(1)利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原a. 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液；b. 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體；c. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物；d. 實驗完畢后，檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為假貨ELISA試劑盒；e. 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性，則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

(2)如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假a. 取出購買的試劑盒A的包被板兩條；b. 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；c. 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；d. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物；e. 實驗完畢后，檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B，即該試劑盒為假貨ELISA試劑盒；f. 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo)，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

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