countstar應用圖像細胞儀應用案例

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應用圖像細胞儀促進生物制品和rAAV生產的細胞系開發(fā)

基于生物制品和AAV的基因療法在疾病治療方面獲得了更多的市場額。然而，開發(fā)一種強大而高效的哺乳動物細胞系來生產它們是具有挑戰(zhàn)性的，并且通常需要廣泛的細胞表征。歷史，流式細胞儀用于這些基于細胞的測定。然而，流式細胞儀相對昂貴，并且需要大量的操作和維護培訓。最近，隨著計算能力和高質量相機傳感器的提高，基于圖像的細胞術得到了創(chuàng)新，為細胞系工藝開發(fā)提供了一種精確且具有成本效益的替代方案。在這項工作中，我們描述了一種細胞系開發(fā)工作流程，該工作流程結合了基于圖像的細胞儀，即Countstar Rigel，用于分別使用表達抗體和rAAV載體的CHO和HEK293細胞進行轉染效率評估和穩(wěn)定池評估。在兩個案例研究中，我們證明：

Countstar Rigel提供了與流式細胞術相似的檢測精度。

基于Countstar Rigel的池評估可以幫助確定單細胞克?。?span>SCC）所需的組。

Countstar Rigel結合的細胞系開發(fā)平臺實現了2.5g/L mAb滴度。

我們還討論了使用Countstar作為基于rAAV DoE的優(yōu)化目標的另一層的可能性。

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應用Countstar FL圖像細胞儀進行細胞周期定量分析

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介紹

在細胞周期分析中，測量DNA結合染料的摻入已經是確定細胞DNA含量的認方法。碘化丙啶（PI）是一種常用于測量細胞周期的核染色染料。在細胞分裂中，含有增加量的DNA的細胞顯示出成比例增加的熒光。熒光強度的差異用于確定細胞周期每個階段的DNA含量。Countstar Rigel系統（圖1）是一種智能、直觀、多功能的細胞分析儀器，可以在細胞周期分析中獲得精確的數據，并可以通過細胞活力測定檢測細胞毒性。易于使用的自動化程序可指導您通過成像和數據采集完成細胞測定。

應用Countstar FL圖像細胞儀研究細胞毒性

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介紹

細胞毒性測定在許多實驗室中被常規(guī)用于各種目的，從評估細胞培養(yǎng)物的健康到評估一組化合物的毒性。用于這些測定的測量工具需要可靠、易于使用且相對快速。Countstar Rigel系統（圖1）是一種智能、直觀的細胞分析儀器，可簡化各種細胞測定，包括轉染、凋亡、細胞表面標記、細胞活力和細胞周期評估。該系統提供了穩(wěn)健的熒光定量結果。易于使用的自動化程序可指導您完成細胞測定形式的成像和數據采集。

使用293和碘化丙啶的GFP轉染效率測定

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介紹

綠色熒光蛋白（GFP）是一種由238個氨基酸殘基（26.9kDa）組成的蛋白質，當暴露于藍色至紫外線范圍的光時表現出明亮的綠色熒光。在細胞和分子生物學中，GFP基因經常被用作表達的報告基因。在修飾的形式中，它已被用于制造生物傳感器，并且已經創(chuàng)造了許多表達GFP的動物，作為基因可以在給定的生物體中表達的概念證明，或者在選定的器官、細胞或興趣中表達。GFP可以通過轉基因技術引入動物或其他物種，并保留在它們及其后代的基因組中。

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