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DNA恒溫快速擴增試劑盒基礎(chǔ)型使用說明書

來源:上海惠誠生物科技有限公司   2024年10月30日 16:20  

產(chǎn)品參數(shù)


試劑組分(WLB8201KITWLB8201KIT48T/盒)
組成規(guī)格數(shù)量功能
A buffer
1.6ml1管主要為穩(wěn)定蛋白/酶,性能的緩沖體系
B buffer0.15ml1管主要為鎂離子等激活體系
正對照模板

0.1ml

1管主要是陽性質(zhì)粒模版為檢驗試劑盒的有效性
正對照引物MIX0.06ml1管
主要是正對照模版的引物組合
凍干粉試劑8T/排,16T/包3包蛋白/酶體系的試劑工藝:凍干粉、凍干微球

注 Tips:

1. 高溫變性不能有效去除蛋白,可能對產(chǎn)物分析造成影響;

2. 市場上部分擴增產(chǎn)物純化試劑盒不適用,可能造成假陰性結(jié)果。

原理概述 :

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術(shù):在常溫恒溫下(一般為39oC~42oC),在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白的幫助下,重組酶和引物形成復(fù)合體;進行同源搜索并結(jié)合目的同源域,此時在該同源位置形成D-loop區(qū)并開始進行鏈交換;伴隨著重組酶從復(fù)合體上解離,聚合酶也結(jié)合到引物的3’末端,開始鏈的延伸。

引物設(shè)計 :

建議使用長度在 30-35 bp 的引物,引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度;引物設(shè)計避免形成二級結(jié)構(gòu)而影響擴增;擴增子長度建議在 150-300 bp,通常不超過 500 bp。


image.png

由于試劑盒靈敏度非常高,在進行反應(yīng)時請注意避免核酸污染,并設(shè)置空白對照;(圖片為凝膠電泳法顯示結(jié)果

產(chǎn)品特點及優(yōu)勢:

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應(yīng)時間短(僅需 30 min)等優(yōu)點;反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),操作簡便,易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進行反應(yīng)操作;無需購買 PCR 儀等價格高昂的設(shè)備。

適用于實驗室級別的DNA擴增以及其他檢測用途的DNA擴增使用。


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