巨噬細(xì)胞清除小課堂 | 第一課：注射方法及給藥

來源：翌圣生物科技（上海）股份有限公司 2024年11月20日 17:52

巨噬細(xì)胞在身體的不同部位發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，然而，為了更深入地研究特定部位巨噬細(xì)胞的具體功能以及它們在疾病發(fā)生發(fā)展中的影響，精準(zhǔn)地清除巨噬細(xì)胞成為了關(guān)鍵的研究手段。氯磷酸鹽脂質(zhì)體（Clodronate Liposomes）是目前最為成熟，最為經(jīng)濟(jì)且最為理想的一種有效的巨噬細(xì)胞清除工具。借助腹腔，尾靜脈等多種給藥方式實(shí)現(xiàn)不同組織部位中巨噬細(xì)胞的清除。

接下來，我們將通過一系列專題分享，為大家展示在不同部位進(jìn)行巨噬細(xì)胞清除的方法與成效，希望能為各位科研工作者提供有益的參考和借鑒。

注射方法介紹

尾靜脈注射

尾靜脈注射在24h后即達(dá)到最大耗竭，應(yīng)注意檢測時(shí)間節(jié)點(diǎn)。

將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi)，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動(dòng)脈和3條靜脈，2條動(dòng)脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面，3條靜脈呈品字型分布，一般采用左右兩側(cè)的靜脈；

將紗布浸泡于約70℃溫水中（或浸泡在酒精中），拿出后包裹尾巴，以達(dá)到使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的；

進(jìn)行尾部靜脈注射時(shí)，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出約2 cm一段，使皮膚緊張，靜脈更為充盈，右手持1 mL針頭注射器，使針頭與靜脈平行(小于30°角)，從尾巴的下1/4處進(jìn)針，開始注入藥物時(shí)應(yīng)緩慢，仔細(xì)觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現(xiàn)，說明已刺入血管，可正式注入藥物；

有的實(shí)驗(yàn)需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥，注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動(dòng)，更換血管位置注射給藥。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓1-2 min，止血；

腹腔注射

腹腔注射在48-72h后達(dá)到最大耗竭，應(yīng)注意檢測時(shí)間點(diǎn)。

首先采用背側(cè)保定法抓取小鼠，使其頭部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住，再用75%酒精棉球消毒注射部位；

小鼠腹腔注射的位置在：下腹部腹中線兩側(cè)0.5cm（與大腿根部平齊）處，未免傷及臟器，保定小鼠時(shí)需使其頭部稍向后仰，以使其下腹部臟器上移；

將注射器針頭刺入皮膚，進(jìn)入皮下后，沿皮下向前推進(jìn)2-3mm，針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔。注意：穿透腹膜后，針尖的阻力消失；

回抽針?biāo)ǎ鐭o回血或液體即可注入藥物；

注射完畢后，輕輕旋轉(zhuǎn)針頭，再緩慢拔出注射器，以免液體外漏。

不同研究部位，也會(huì)有不同的注射方法，如：皮下注射、氣管給藥、顱內(nèi)注射等。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)參考相關(guān)文獻(xiàn)及咨詢Yeasen技術(shù)團(tuán)隊(duì)。

給藥周期及計(jì)量

短期給藥

即注射一次氯磷酸鹽脂質(zhì)體200 μl（20-25g體重），在特定時(shí)間檢測巨噬細(xì)胞清除效率或進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

長期給藥

即需要超過一周或以上實(shí)現(xiàn)巨噬細(xì)胞清除。以WT小鼠為例，一般先給藥200 μl（20-25g體重），之后每2 - 3天給藥一次，每次用量100μl-150μl。

參考試驗(yàn)方案

器官/ 巨噬細(xì)胞	劑量用法 (20-25g/每只小鼠 )
脾臟/紅髓區(qū)巨噬細(xì)胞	單次給藥：200 µl/小鼠 (靜脈注射或腹腔注射)。長期耗竭：第一次給藥劑量200 µl/小鼠（25g左右），以后按2-3天一次給藥100 µl/小鼠
肝臟/Kuffer細(xì)胞	單次給藥：200 µl/小鼠 (靜脈注射或腹腔注射)。長期耗竭：第一次給藥劑量200 µl/小鼠，以后按2-3天一次給藥100 µl/小鼠
肺/肺泡巨噬細(xì)胞	靜脈注射（150-200 µl）聯(lián)合氣管內(nèi)或鼻內(nèi)（50 µl）獲得最佳效果。
淋巴結(jié)	注射(100-200 µl)/小鼠，具體給藥方案可參考文獻(xiàn)。
腦/小膠質(zhì)細(xì)胞	腦室內(nèi)進(jìn)入腦脊液，10 µl/小鼠，50 µl/大鼠。
血液/單核細(xì)胞	150-200 µl/小鼠（靜脈注射），24小時(shí)內(nèi)可達(dá)最大耗竭率，但1-7天的最大耗竭率與小鼠品系有關(guān)。

注：以上僅參考，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)參考相關(guān)文獻(xiàn)及咨詢YEASEN技術(shù)團(tuán)隊(duì)

產(chǎn)品推薦

產(chǎn)品名稱	貨號	規(guī)格
Clodronate Liposomes(From Vrije Universiteit Amsterdam) 體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除劑	40337ES08	5 mL
	40337ES10	10 mL
Control Liposomes( PBS ) 體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除劑空白脂質(zhì)體對照	40338ES08	5 mL
Control Liposomes( PBS ) 體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除劑空白脂質(zhì)體對照	40338ES10	10 mL

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