S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化：植物生長的關(guān)鍵標志物

核糖體S6激酶1/2（S6K1/2）參與TOR信號通路，參與滲透脅迫反應(yīng)。被PDK1激活，在滲透脅迫下被抑制。在所有組織中表達，特別是在生長芽、根尖、葉緣和發(fā)芽種子的高代謝活動期間。替代名稱：AtPK1/AtPK6 S6K1）、AtPK2/AtPK19（S6K2）。

艾美捷S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化：

貨號：AS13-2664

免疫原：與KLH偶聯(lián)的肽段，含有磷酸化蘇氨酸（phospho-Thr），來源于擬南芥S6K1（UniProt: P42818，TAIR: AT3G08730）和S6K2（UniProt: Q39030，TAIR: AT3G08720）。由于高度氨基酸同源性，所選肽段在這兩種蛋白（S6K1和S6K2）中均保守。

宿主：兔子

克隆性：多克隆

純度：免疫原親和純化的血清，溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液（PBS）中。

形式：凍干

數(shù)量：50 µg

復(fù)溶：復(fù)溶時加入50 µl無菌水。

儲存：凍干品/復(fù)溶后儲存于-20°C；復(fù)溶后請分裝保存，避免反復(fù)凍融。打開前請短暫離心管子，以避免因物質(zhì)粘附在管蓋或管壁上而導(dǎo)致的損失。切勿在4°C下儲存該抗體。

測試應(yīng)用：西方印跡（WB）

推薦稀釋度：1:500（WB）

預(yù)期 | 表觀分子量：S6K1為52.6 kDa，S6K2為53 kDa | 60 kDa

確認的反應(yīng)性：擬南芥

預(yù)測的反應(yīng)性：甘藍、鹽芥

未反應(yīng)的：目前尚未發(fā)現(xiàn)與預(yù)測反應(yīng)性不符的已知例外。

應(yīng)用舉例：

從10天齡的擬南芥幼苗中提取30 µg總蛋白，提取緩沖液為Lacus緩沖液，有或無磷酸酶抑制劑，并在變性前于4°C保存。樣品在95°C下變性5分鐘，隨后在6.5% SDS-PAGE上分離，并轉(zhuǎn)印至PVDF膜，轉(zhuǎn)印時間為2小時。磷酸酶處理使用CIAP（“+”表示添加磷酸酶抑制劑，“-”表示未添加磷酸酶抑制劑）。膜在室溫下用5%脫脂奶粉（TBST）封閉1小時，期間不斷攪拌。膜在4°C下用一抗（稀釋度1:500）孵育過夜，期間不斷攪拌。棄去抗體溶液后，膜用TBST洗滌三次，每次15分鐘，期間不斷攪拌。膜在室溫下用二抗（山羊抗兔IgG，辣根過氧化物酶偶聯(lián)，Agrisera，AS09 602）孵育1小時，稀釋度為1:10,000，期間不斷攪拌。膜用上述方法洗滌后，用ECL顯色5分鐘，按照制造商的說明操作。曝光時間為幾分鐘。

感謝西班牙CRAG的Rossana Henriques博士提供支持。

其他信息（應(yīng)用）：

蛋白質(zhì)提取后，提取物必須立即進行SDS-PAGE電泳，不得冷凍。

S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化文獻參考：

Tanigawa et al. (2024). FYVE1/FREE1 is involved in glutamine-responsive TORC1 activation in plants. iScience. 2024 Aug 26;27(9):110814. doi: 10.1016/j.isci.2024.110814.  

Li et al. (2023). Mitigating growth-stress tradeoffs via elevated TOR signaling in rice. Mol Plant. 2023 Dec 5:S1674-2052(23)00396-9. doi: 10.1016/j.molp.2023.12.002.

Primo et al (2022). Plasma membrane H+-ATPases promote TORC1 activation in plant suspension cells. iScience. 2022 Apr 11;25(5):104238. doi: 10.1016/j.isci.2022.104238. PMID: 35494253; PMCID: PMC9046228.

Wang et al. (2022), FERONIA functions through Target of Rapamycin (TOR) to negatively regulate autophagy, Front. Plant Sci., 23 August 2022, Sec. Plant Cell Biology, Volume 13 - 2022,