緩沖液是一種能夠抵抗溶液中因添加少量酸或堿而引起的pH變化的液體。通常由弱酸及其鹽或弱堿及其鹽配制而成。許多生物化學(xué)反應(yīng)需要在穩(wěn)定的pH環(huán)境下進(jìn)行,比如血液就是一個(gè)重要的緩沖體系。今天我們來一起學(xué)習(xí)一下PBS緩沖液吧~
一、PBS緩沖液優(yōu)點(diǎn)
PBS的緩沖pH值范圍非常廣,可配置各種pH值的酸、堿、中性緩沖液,是最常見的緩沖體系之一。配制酸性磷酸緩沖液可直接用NaH2PO4,或KHPO,pH范圍在1-5;堿性緩沖液可直接用NaH2PO4,或K2HPO4,,pH范圍在9-12;中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4,和Na2HPO4,溶液混合,pH在5.5-8.5。
二、PBS緩沖液缺點(diǎn)
PBS的緩沖能力強(qiáng),應(yīng)用范圍廣,但也有缺點(diǎn)。
①易與常見的鈣離子Ca2+、鎂離子Mg2+等重金屬離子結(jié)合形成沉淀。
②會(huì)抑制某些反應(yīng),比如抑制某些酶的催化作用。
三、PBS緩沖液配制
以0.2mol/L中性磷酸緩沖液為例,不同摩爾濃度緩沖液加純化水稀釋即可(緩沖液的摩爾濃度指的是磷酸根的濃度,所以若稀釋后pH值有微小變化需要調(diào)整,不要用帶有磷酸根的溶液):磷酸氫二鈉(Na2HPO4*,0.2mol/L):28.39g/L;磷酸二氫鈉(NaH2PO4*,0.2mol/L):24g/L*注意是否是水合物,水合物需根據(jù)含水量重新計(jì)算固體用量。不同pH的PBS可由不同比例的上述溶液混合而成。配制100mLPBS緩沖液所用量如下圖所示:
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